武雪亮，王立坤，薛 军*，杨东东，屈 明，郭 飞，杨瑞敏，刘 博

    ·论著·

    下调DNA结合分化抑制蛋白1基因对人结肠癌SW480细胞株体外转移和侵袭能力的影响研究

    武雪亮1，王立坤2，薛 军1*，杨东东3，屈 明1，郭 飞1，杨瑞敏2，刘 博4

    背景 既往研究已经证实DNA结合分化抑制蛋白1(Id-1)表达升高在结直肠癌的发生、发展中发挥重要作用，但Id-1对结肠癌细胞侵袭行为影响及机制的研究较少。目的 探讨下调Id-1基因对人结肠癌SW480细胞株增殖、转移、侵袭能力的影响及作用机制。方法 2016年1—6月，人结肠癌SW480细胞株分为3组：空白组，未进行转染；空载体组，用空载体进行转染；抑制组，采用Id-1特异小干扰RNA(siRNA)进行转染，采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和Western blotting法检测各组细胞Id-1和Ki-67基因及蛋白的表达情况，采用MTT法检测细胞增殖能力，采用细胞划痕实验、Transwell小室和Matrigel侵袭实验评价Id-1对细胞转移和侵袭能力的影响。结果 3组细胞Id-1、Ki-67 mRNA及其相应蛋白表达水平比较，差异均有统计学意义(P0.05)。培养第3～7天，3组细胞增殖OD值比较，差异均有统计学意义(P1 材料与方法

    1.1 材料与主要试剂 人结肠癌SW480细胞株由河北北方学院科研中心保存，RPMI-1640培养基购于美国Invitrogen公司，Id-1单克隆一抗购于Merck Millipore公

    本研究背景及创新点：

    DNA结合分化抑制蛋白1(Id-1)系螺旋-环-螺旋转录因子家族重要成员之一，具备广泛的生物学功能，能够抑制细胞分化、促进细胞增殖，适当条件下可抑制细胞凋亡，是细胞周期调控肿瘤血管发生的关键分子，其通过加快细胞周期、促进血管、淋巴管的生成，在肿瘤的发生、发展过程中扮演着重要角色。既往研究从基因、蛋白水平已证实Id-1表达升高在结直肠癌的发生、发展中发挥重要作用，且其表达与人基质金属蛋白酶(MMP)-9、MMP-2、血管内皮生长因子(VEGF)、微血管密度、微淋巴管密度具有明显相关性。本研究进一步将Id-1干扰序列转染至人结肠癌SW480细胞株中，并以空白组和空载体组作为对照，采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和Western blotting法检测各组细胞Id-1和Ki-67基因及蛋白的表达情况，并采用MTT法检测细胞增殖能力，采用细胞划痕实验、Transwell小室和Matrigel侵袭实验评价Id-1对细胞转移和侵袭能力的影响 ......