雷公藤红素对肾透明细胞癌786-0细胞的作用及其机制研究
膜电位,2结果,3讨论
张小路,杜梅红,张 全,陈红跃,赵 林,郭伟胜·论著·
雷公藤红素对肾透明细胞癌786-0细胞的作用及其机制研究
张小路1*,杜梅红2,张 全1,陈红跃1,赵 林1,郭伟胜2
背景 肾透明细胞癌发病率高,治愈率低。雷公藤红素可调节肿瘤细胞中细胞因子,从而抑制肿瘤细胞增殖。而有关雷公藤红素对肾透明细胞癌786-0细胞的作用研究较少。目的 探讨雷公藤红素对肾透明细胞癌786-0细胞的作用及其机制,以期为探索治疗肾透明细胞癌的药物提供借鉴。方法 2015年2月—2016年5月,培养肾透明细胞癌786-0细胞和正常肾小管上皮细胞HK2细胞(简称肾细胞HK2细胞)。检测不同浓度(0、0.5、1.0、1.5、2.0 μmol/L)雷公藤红素作用不同时间(12、24、48 h)肾透明细胞癌786-0、肾细胞HK2细胞存活率;检测不同浓度(0、0.5、1.0、1.5、2.0 μmol/L)雷公藤红素、1.5 μmol/L 5-氟尿嘧啶(5-Fu)作用下肾透明细胞癌786-0、肾细胞HK2细胞毒性;检测不同浓度(0、1.5、2.0 μmol/L)雷公藤红素、1.5 μmol/L 5-Fu作用下肾透明细胞癌786-0、肾细胞HK2细胞周期、凋亡率;检测不同浓度(0、0.5、1.0、1.5 μmol/L)雷公藤红素作用下肾透明细胞癌786-0、肾细胞HK2细胞线粒体膜电位;检测不同浓度(0、0.5、1.0、1.5 μmol/L)雷公藤红素作用下肾透明细胞癌786-0细胞中含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(caspase)-3、caspase-9活性,Bax、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、细胞色素c、磷酸多核糖基核糖醇(PRRP)水平。结果 0、0.5、1.0、1.5、2.0 μmol/L雷公藤红素作用12、24、48 h时肾透明细胞癌786-0细胞存活率随浓度增加依次减小(P1 材料与方法
1.1 材料与仪器 肾透明细胞癌786-0细胞株、正常肾小管上皮细胞HK2细胞(简称肾细胞HK2细胞)购自中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所;雷公藤红素(纯度>98%)购自上海融禾医药科技发展有限公司;乳酸脱氢酶(LDH)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(caspase)-3、caspase-9试剂盒购自GIBICO;3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)溶液、5-氟尿嘧啶(5-Fu)购自Sigma公司;Bax、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、细胞色素c、磷酸多核糖基核糖醇(PRRP)等兔抗人抗体(一抗)购自艾美捷科技有限公司;转膜仪购自Bio-Rad公司;FACSVerse流式细胞仪购自BD公司 ......
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