罗 伟，崔 森，冀林华，王红心，李玉丽，马晓静，马 婕

    ·论著·

    蛋白C基因多态性及血浆蛋白C水平与慢性高原病易感性的关系研究

    罗 伟*，崔 森，冀林华，王红心，李玉丽，马晓静，马 婕

    目的 探究蛋白C(PC)基因多态性及血浆PC水平与慢性高原病(CMS)易感性的关系。方法 选择2014年1月—2015年10月移居青海省玉树藏族自治州玉树县青年男性汉族CMS患者30例为CMS组，同期移居而未发生CMS的青年男性汉族健康志愿者30例为对照组。采用PCR直接测序法检测PC基因-1654C/T、-1641A/G、-1476A/T位点多态性，采用ELISA法检测血浆PC水平。比较两组PC基因不同位点多态性及血浆PC水平。结果 CMS组与对照组PC基因-1654C/T位点基因型频率比较，差异有统计学意义(P0.05)。CMS组与对照组PC基因-1641A/G位点基因型频率比较，差异有统计学意义(P0.05)。CMS组与对照组PC基因-1476A/T位点基因型频率比较，差异有统计学意义(P0.05)。CMS组血浆PC水平低于对照组(P1 资料与方法

    1.1 一般资料 选择2014年1月—2015年10月移居青海省玉树藏族自治州玉树县(海拔3 600～3 700 m)青年男性汉族CMS患者30例为观察组，平均年龄(37.4±7.2)岁；平均移居时间(1.7±0.7)年。同期移居而未发生CMS的青年男性汉族健康志愿者30例为对照组，平均年龄(36.8±8.0)岁；平均移居时间(1.8±0.6)年。两组受试者年龄(t=0.442)、移居时间(t=0.761)比较，差异无统计学意义(P>0.05)。本研究经青海大学附属医院伦理委员批准，受试者均对本研究知情同意。

    1.2 CMS患者的纳入标准 (1)均符合2004年第六届国际高原医学和低氧生理学术大会制定的相关诊断标准[7]；(2)移居青海1年以上；(3)除CMS外无其他疾病；(4)无家族性遗传疾病。

    1.3 方法

    1.3.1 DNA提取 所有受试者禁食12 h后于清晨采集空腹静脉血，EDTA抗凝，低温(-20 ℃)保存，所有血样采集完毕后参照血液基因组DNA提取试剂盒说明书提取DNA。

    1.3.2 PCR扩增和直接测序 从NCBI数据库下载PC基因序列(NC 000002.11)，应用软件Primer 5.0设计引物，同时在GeneBank中进行同源性比对，挑选最佳引物对，最后确定引物对为5′-ATTGGGATGGCATGTC ATTG-3′和5′-CCCTGGCTGGAGGATTCAG-3′ ......