王丽，李杰辉，张春霞，狄钾骐，刘明，刘雪琴

    糖尿病性溃疡是糖尿病患者严重的并发症之一。研究表明，15%～20%糖尿病患者在糖尿病发展进程中会出现足部溃疡甚至坏疽，导致截肢率大幅提高，糖尿病性溃疡是糖尿病患者致残、致死的重要原因之一[1-3]。糖尿病患者皮肤存在“隐形损害”[4]，晚期糖基化终末产物(AGEs)与AGEs受体(RAGE)在内皮细胞表面结合后，会启动一系列受体信号转导途径参与糖尿病创面愈合，其中作为炎性损伤相关的血管内皮因子，细胞间黏附分子1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子1(VCAM-1)发挥着关键作用[5]。湿润烧伤膏(MEBO)目前广泛应用于皮肤溃疡创面的修复[6-7]，取得较好的临床疗效，本课题组前期发现其促愈机制可能与调控创面组织AGEs-RAGE信号转导通路有关[8]，本研究在此基础上观察MEBO对糖尿病性溃疡创面组织ICAM-1、VCAM-1 mRNA表达及超微结构的影响，进一步探讨MEBO促进糖尿病性溃疡创面愈合的药物作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物 健康雄性SD大鼠145只，SPF级，12周龄，体质量(220±30)g，由广西医科大学实验动物中心〔许可证号SCXK(桂)2009-0002〕提供。大鼠饲养环境：温度20～25 ℃，相对湿度(60±10)%，单笼饲养2周适应环境后用于实验。本研究经广西壮族自治区中医药研究院实验动物伦理委员会批准。

    1.2 实验药品与试剂 MEBO(汕头市美宝制药有限公司，生产批号：400803A)，链脲佐菌素(STZ)(美国Sigma公司，生产批号：SLBH0076V)，低精蛋白锌胰岛素注射液(江苏万邦生化医药股份有限公司，生产批号：13102312)，Trizol试剂盒(美国Invitrogen公司)，重组牛碱性成纤维细胞生长因子(贝复济，珠海亿胜生物制药有限公司，批号：20140403)，1st Strand cDNA合成试剂盒(日本TaKaRa Bio株式会社)，Power SYBR? Green PCR Master Mix( 美 国 ABI公司)。引物设计及合成由中山大学达安基因股份有限公司完成。引物序列如下：ICAM-1上游引物：5'-CTGCAGAGCACAAACAGCAGA-3'， 下 游 引 物：5'-AAGGCCGCAGAGCAAAAGAAGC-3'；VCAM-1 上游引物：5'-TAAGTTACACAGCAGTCAAATGGA-3'，下游引物：5'-CACATACATAAATGCCGGAATCTT-3'；β-actin上游引物：5'-TCCGTAAAGACCTCTATGCC-3' ......