杜霄，许超，涂彧，周菊英*

    机体的电离辐射损伤一直是放疗科医生非常关注的问题。辐射可直接作用于细胞关键靶点，导致DNA单链或者双链发生断裂；亦可作用于水分子，产生大量自由基，直接攻击细胞膜和细胞核内的DNA，造成DNA的间接损伤，引发不饱和脂肪酸脂质过氧化进而使细胞膜损伤、各种亚细胞结构破坏、酶活性降低和消失，如何避免或者减少这种损伤是目前研究的重点。精胺是一类广泛分布的多胺，具有抗氧化、抗衰老、抗癌、调节细胞增殖以及维持细胞膜、核酸和离子通道等细胞结构稳定性的功能[1-3]。有研究表明，外源性精胺可使大鼠离体胸主动脉环收缩，并在一定范围内呈浓度依赖性[4]；细胞内精胺浓度变化可影响细胞的生长代谢过程。目前，精胺和放射导致的心肌氧化损伤之间的关系并不明确，相关研究甚少。因此本研究旨在探讨精胺类药物对辐射所致氧化损伤的心肌细胞是否具有保护作用。

    1 材料与方法

    1.1 研究时间 2018年12月至2020年12月。

    1.2 实验材料 spermine(美国sigma公司)，H9c2细胞系(中科院上海细胞库)，DMEM培养基(美国corning公司)，新生胎牛血清(美国gibco公司)，胰蛋白酶(美国gibco公司)，青霉素-链霉素溶液(上海碧云天科技有限公司)，PBS(上海源培生物科技有限公司)，CCK8试剂盒(日本同仁公司)，超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒(南京建成生物工程研究所，货号：A001-1-1，生产批号：20190628)，丙二醛(MDA)试剂盒(南京建成生物研究所，货号：A003-1-1，生产批号：20190629)，Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒(大连美伦生物技术有限公司：100T，货号：MAO220-2，批号：Feb-28E)。

    1.3 实验仪器 MCO-18AC CO2细胞培养箱(日本松下健康医疗器械株式会社)，倒置荧光显微镜(日本奥林巴斯公司)，酶标仪(MK3型，美国Thermo公司)，DK-500电热恒温水浴箱(上海精宏实验设备有限公司)，DK-S22电热恒温水锅(上海精宏实验设备有限公司)，BY-G20型医用离心机(北京白洋医疗器械有限公司)，西门子primus医用直线加速器，流式细胞仪(美国BD公司)。

    1.4 H9c2心肌细胞的培养 将H9c2心肌细胞置于含10%胎牛血清、1%双抗的DMEM高糖培养液，37 ℃、5% CO2、饱和湿度的培养箱中培养。

    1.5 细胞存活率 取对数生长期的H9c2心肌细胞接种于96孔板，104个细胞/孔 ......