程经纬，柳杨青，汪艳芳

    肌肉生长抑制素(Mstn)是1997年发现的于骨骼肌中高表达的转化生长因子β超家族成员之一，又称为生长分化因子8，其从小鼠骨骼肌cDNA文库克隆，对肌肉量起负调节作用[1]。除影响肌肉生长分化外，Mstn还具有调节脂代谢的作用。文献报道，Mstn可在体外抑制前体脂肪细胞的分化；特异性敲除Mstn基因后，高脂或正常饮食喂养的小鼠均表现为脂肪量减少，肌肉量增加[2-3]。本研究观察Mstn基因敲除的2型糖尿病(T2DM)小鼠白色脂肪棕色化相关基因表达变化，探究Mstn对T2DM小鼠白色脂肪棕色化的影响。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物 野生型(wild type，WT)小鼠12只，杂合型Mstn基因敲除〔Mstn(+/-)〕小鼠12只，纯合型Mstn基因敲除〔Mstn(-/-)〕小鼠12只，SPF级，品系C57BL/6N，6周龄，雄性，由赛业生物科技有限公司提供〔动物实验许可证号：SCXK(苏)2020-0006〕。小鼠适应性饲养1周，室内温度22～24 ℃，湿度40%～60%，保持昼夜12 h节律，自由进食、饮水。本研究实验过程遵循河南大学实验动物伦理相关规定，符合3R原则。本实验时间为2019年1月至2020年1月。

    1.2 主要仪器与试剂 AU400全自动生化分析仪(美国Beckman公司)；酶标仪(美国BioTeK公司)；脱水机、包埋机、病理切片机(武汉俊杰电子有限公司)；光学显微镜及成像系统(日本Nikon公司)；脱色摇床、电泳仪(北京六一生物科技有限公司)；链脲佐菌素(STZ，美国Sigma公司)；游离脂肪酸(FFA)酶联免疫试剂盒、兔抗小鼠过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(PGC-1α)、解偶联蛋白1(UCP1)多克隆抗体(武汉云克隆科技股份有限公司)；兔抗小鼠分化簇137(CD137)多克隆抗体(北京博奥森生物技术有限公司)。

    本研究行业贡献：

    目前的肥胖控制手段仍然有限，缺乏治疗肥胖和相关代谢性疾病的有效药物。白色脂肪主要用于储存热量，棕色脂肪主要负责产热。探究白色脂肪向棕色脂肪转化的调控机制以及对外部刺激的感应机制，有助于开发治疗肥胖的新药物。既往研究表明，肌肉生长抑制素(Mstn)可能调控脂肪代谢。本研究在Mstn基因敲除基础上构建2型糖尿病(T2DM)小鼠模型，探究Mstn对T2DM小鼠白色脂肪棕色化的影响，发现抑制Mstn基因表达可上调白色脂肪棕色化相关基因表达，促进T2DM白色脂肪棕色化 ......