体外电转染TGF-β1质粒对背根神经节轴突生长的影响①
胞体,1材料和方法,1实验动物,2主要实验仪器和试剂,3背根神经节细胞的分离,培养与分析,4Western-blot检测TGF-β1,5统计学分析,2结果,1背根神经节细胞形态,2背根神经节细胞轴突长度
胡译文,张 衡,王锐英,沈 翀,刘瑞端,张 衡,王锐英,沈 翀,刘瑞端(桂林医学院附属医院骨科,广西 桂林 541001)
周围神经损伤是生活和工作中的常见事件,周围神经在受到机械外力及各种理化因素损伤后,其神经元胞体、轴突、髓鞘等均会发生一系列的变性反应。病理表现为胞体肿大,尼氏体溶解或消失。修复周围神经损伤的关键是神经元胞体的存活及轴突的延伸[1]。近年来运用转基因技术治疗周围神经损伤已成为研究热点[2]。转化生长因子β1(transforming growth factor beta1,TGF-β1)是一种相对分子质量为 25 000 的活性多肽,属于转化生长因子TGF-β(transforming growth factor beta)多肽家族,具有拮抗肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-alpha,TNF-a)的效应,抑制细胞内钙离子浓度变化,拮抗兴奋性氨基酸的神经毒性作用。周围神经挤压损伤,TGF-β1含量上升[3-4]。质粒是小型环状DNA分子,是基因工程最常用、最简单的载体。笔者应用电转染方法将构建的TGF-β1质粒转染入背根神经节细胞中[5],培养背根神经节细胞,然后,观察TGF-β1对背根神经节细胞轴突生长的影响。
1 材料和方法
1.1 实验动物
8~10周龄C57BL/6健康雄性小白鼠6只,体重25~35 g,来源于桂林医学院实验动物中心。小鼠的饲养与实验均在桂林医学院实验动物中心完成 ......
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