使用ｈＴＥＲＴ启动子实现肿瘤特异性ＲＮＡ干扰
 |
| 第1页 |
参见附件(231KB，3页)。
李立文 胡蕴玉 舒茂国 王臻 郭树忠 郭晓彤 第四军医大学西京医院全军骨科研究所 第四军医大学西京医院全军骨科研究所 第四军医大学西京医院整形外科 第四军医大学西京医院全军骨科研究所 第四军医大学西京医院整形外科 第四军医大学西京医院肿瘤科
【摘要】目的:修饰hTERT核心启动子,构建shRNA表达载体,实现肿瘤特异性RNA干扰。方法:使用人工TATA盒修饰hTERT核心启动子,重建转录起点。将含有修饰后hTERT启动子的MluI/XhoI片段克隆至pGL3-OCP-shLuc的相应酶切位点,获得pGL3-mhTERT-shLuc。设计针对p53的shRNA编码序列,并以XhoI/XbaI克隆至pGL3-mhTERT-shLuc的相应酶切位点之间,获得pGL3-mhTERT-shp53。使用pGL3-mhTERT-shLuc与pGL3-control共转染人骨肉瘤细胞U2OS、MG-63和HOS,48h后测定虫荧光素酶活性,计算相对活性。
【关键词】 RNA干扰 荧光素酶 骨肉瘤
【基金】国家自然科学基金资助项目(批准号:30170952; 30400450)
【分类号】R73-36
现已表明在85%以上的人类肿瘤细胞中均存在端粒酶的再激活[1]。而人端粒酶逆转录酶亚基(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)启动子作为肿瘤特异性启动子已经被广泛用于靶向转录基因治疗研究中[2~7]。为了实现肿瘤特异性RNA干扰(RNA interference,RNAi),使得小发
------
[摘要]目的：修饰hTERT核心启动子，构建shRNA表达载体，实现肿瘤特异性RNA干扰。方法：使用人工TATA盒修饰hTERT核心启动子，重建转录起点。将含有修饰后hTERT启动子的M1uI/XhoI片段克隆至pCL3-0CP-shLuc的相应酶切位点，获得pGL3-mhTERT-shLuc。
您现在查看是摘要介绍页，详见PDF附件(231KB，3页)。