快速贴壁法分选表皮干细胞及其评价
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刘虎仙 贾赤宇 付小兵 胡大海 第四军医大学西京医院烧伤科 第四军医大学西京医院烧伤科 解放军总医院第一附属医院全军烧伤研究所 第四军医大学西京医院烧伤科
【摘要】目的:认识表皮干细胞对IV型胶原的黏附特性,评价重复利用IV型胶原以快速贴壁法在分选表皮干细胞中的作用。方法:未包被胶原培养瓶的细胞作为对照组I,首次IV型胶原和三次IV型胶原包被的培养瓶分别作为实验组I和实验组II,将包被IV型胶原并曾黏附细胞的培养瓶消化后作为实验组III。人角质形成细胞分别接种其上,15min后对贴壁细胞进行显微摄像并计数,数据用SAS软件分析。对贴壁细胞的生长及增殖活性进行观察,并用β1整合素、K19对贴壁的细胞进行鉴定。结果:与对照组相比,胶原包被组的贴壁细胞数明显增多(P≤0.05),并于5天铺满培养瓶底,而对照组12天后仍未铺满瓶底。各实验组细胞15min贴壁数无明显差异(P0.05)。贴壁细胞β1整合素和K19表达阳性。结论:表皮干细胞对IV型胶原具有较好的黏附特性,利用快速贴壁法可以得到较高纯度的表皮干细胞,重复利用IV型胶原对表皮干细胞的黏附特性几乎无影响并可节约费用。
【关键词】 表皮干细胞 分选 IV型胶原
【基金】国家重点基础研究规划资助项目(G1999054204) 国家自然科学基金(NO.3023037030400172)
【分类号】Q813.11
表皮干细胞位于基底膜之上基底层,约占基底细胞的1%～10%[1],它与基底膜以半桥粒连接,相邻细胞以桥粒连接,具有慢周期性和巨大的增殖潜能。本实验拟用IV型胶原分选表皮干细胞,认识其对该胶原的黏附特性,并评价IV型胶原利用次数对表皮干细胞贴壁的影响作用,以便为以后进一步研
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[摘要]目的：认识表皮干细胞对Ⅳ型胶原的黏附特性，评价重复利用Ⅳ型胶原以快速贴壁法在分选表皮干细胞中的作用。方法：未包被胶原培养瓶的细胞作为对照组Ⅰ，首次Ⅳ型胶原和三次Ⅳ型胶原包被的培养瓶分别作为实验组Ⅰ和实验组Ⅱ，将包被Ⅳ型胶原并曾黏附细胞的培养瓶消化后作为实验组Ⅲ人角质形成细胞分别接种其上，15min后对贴壁细胞进行显微摄像并计数，数据用SAS软件分析。对贴壁细胞的生长及增殖活性进行观察，并用e1整合素、K19对贴壁的细胞进行鉴定。结果：与对照组相比，胶原包被组的贴壁细胞数明显增多(P≤ 0.05)，并于5天铺满培养瓶底，而对照组12天后仍未铺满瓶底。各实验组细胞15min贴壁数无明显差异(P>0.05)。贴壁细胞β1整合素和K19表达阳性。结论：表皮干细胞对Ⅳ型胶原具有较好的黏附特性，利用快速贴壁法可以得到较高纯度的表皮干细胞，重复利用Ⅳ型胶原对表皮干细胞的黏附特性几乎无影响并可节约费用。
[关键词]表皮干细胞；分选；Ⅳ型胶原
[中图分类号]Q813.1+1 [文献标识码]A [文章编号]1008-6455(2006)05-0501—03
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