大鼠脂肪干细胞(ｒＡＤＳＣｓ)转运ＶＥＧＦ基因促进随意皮瓣成活率的研究(1)

http://www.100md.com 2007年1月1日 雷永红 付小兵 盛志勇等

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     鲁开化 赵京禹 孙同柱 韩 冰 陈 伟

    [摘要]目的：探讨人血管内皮细胞生长因子(VEGF165)基因转染大鼠脂肪干细胞(rADSCs)的稳定表达系统对皮瓣成活的影响。方法：①培养和鉴定大鼠ADSCs，脂质体介导pcDNA3.1-VEGF165质粒转染大鼠(rADSCs)，经G418筛选抗性rADSCs并继续培养4周，用ELISA法检测转染后细胞培养上清中VEGF浓度。②Brdu标记被转染rADSCs后，在大鼠背部制备8.0cm×2.5cm的随意型皮辦模型，实验组(10只大鼠)为注射pcDNA3.1-VEGF165质粒转染的rADSCs悬液到大鼠腹腔，对照组(8只大鼠)为注射2ml被空载体pcDNA3.1(一)转染的rADSCs悬液，术后7天用透明纸描记法记录皮瓣成活范围，记数坐标纸格子并换算为成活面积百分率。分别于术后3天、5天、7天在成活皮瓣的远端切取皮瓣组织标本行免疫组化染色。结果：①ELISA检测4株转染和经G418筛选抗性并继续培养2周的第二代rADSCs上清中VEGF浓度多达(4.21±0.35)pmol VEGF/1×10⁶细胞/48h(x±s，n=4)，有2株细胞培养液上清分泌VEGF较强，其余2株细胞相对较弱 ......

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