白细胞介素－10对人牙囊细胞ＲＡＮＫＬ表达的影响
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[摘要]目的：研究人牙囊细胞白细胞介素-10(interleukin-10，IL-1O)蛋白的表达及其对破骨细胞分化因子(receptor act.-vator of nuclear factor kappa B ligand，RANKL)表达的影响。方法：采用组织块加胶原酶消化法培养人牙囊细胞，进行IL-10免疫组化染色。25ng/mlIL-10作用于牙囊细胞O、1、3、6 h，用RT—PeR检测RANKL mRNA表达的变化。结果：人牙囊细胞IL-1O表达阳性。25ng/ml IL-1O降低人牙囊细胞RANKL的表达，且具有时间依赖性。结论：人牙囊细胞表达IL-10，IL-10通过降低人牙囊细胞RANKL的表达，在牙齿萌出过程中起重要的调控作用。
[关键词]人牙囊细胞；白细胞介素-1O；破骨细胞分化因子
[中图分类号]R783 [文献标识码]A [文章编号]1008—6455(2007)02一02 34—03
牙囊是一层包绕未萌出牙齿的纤维囊性结缔组织，牙囊细胞通过参与破骨作用使牙槽骨吸收，进而形成牙齿萌出道，在牙齿萌出过程中发挥着关键作用。这一过程受到许多因子的调控，其中骨保护素(osteoprotegerin，OPG)和破骨细胞分化因子(RANKIJ)是直接控制破骨细胞形成和分化的功能因子。白细胞介素10(IL-IO)是一种炎症抑制因子，具有抑制破骨的作用。研究表明它能够抑制牙槽骨的破骨细胞性骨吸收。本实验研究体外培养的人牙囊细胞IL-IO蛋白的表达及其对RANKL表达的影响，进一步探讨牙齿萌出的机制。
1材料和方法
1.1实验材料：DMEM培养液(Hyclone，uSA)，胎牛血清(Gibco，USA)，兔抗人IL-10多克隆抗体(Santa Cruz，USA)，辣根过氧化物酶标记羊抗兔IgG抗体(Santa Cruz，USA)，IL-IO(Pepro Tech，USA)，TRIzol Reagent(Invitrogen，USA)，逆转录试剂盒(Invitrogen，USA)。
1.2人牙囊细胞的体外培养与鉴定：取12～16岁因正畸需要拔除的下颌第三磨牙的牙囊组织，采用组织块加胶原酶消化法培养人牙囊细胞 ......
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