DOC-1基因的原核表达载体构建及其重组蛋白的表达纯化(2)
3.2 重组表达载体的构建与鉴定：从转化了重组质粒的DH5α菌株中提取质粒，用BamH Ⅰ和Xho Ⅰ进行双酶切鉴定，可见电泳中有一约348bp左右的目的基因片断和一大分子量的载体片断，测序结果也显示与人的DOC-1基因中CDS序列(GenBank NM-004642)一致。3.3 重组蛋白的原核表达鉴定：SDS—PAGE分析结果显示，经IPTG诱导的含重组质粒的E.coliBL21在相对分子量38000左右的位置上出现一条新的条带。
3.4 重组蛋白的纯化：超声破碎菌体并离心后，分别取裂解液上清与沉淀进行SDS—PAGE，显示目的蛋白主要在上清中表达 ......
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