SYBR green实时荧光定量PCR检测VEGF mRNA方法的建立(1)

http://www.100md.com 2008年7月1日 栾　琪　孙　静　孙林潮　李春英　高天文

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     [摘要]目的：建立SYBR green 实时荧光定量PCR 检测VEGF mRNA 水平的方法，并初步应用于美容相关疾患。方法：构建内参GAPDH 质粒，倍比稀释VEGF 和GAPDH 标准品，建立PCR 标准曲线，同时绘制熔解曲线，后应用SYBR Green 实时荧光定量PCR 检测正常皮肤、烧伤瘢痕、恶性黑素瘤细胞株A2058和WM793 cDNA的VEGF mRNA 水平。结果：VEGF、GAPDH的标准曲线，符合线性要求，相关系数r均为1，熔解曲线峰值单一，产物特异度好，四组样本的SYBR green 荧光定量PCR结果提示瘢痕组织、A2058、WM793 的VEGF mRNA 水平明显高于正常皮肤。结论：本研究成功建立了VEGF mRNA 水平的SYBR green 荧光定量PCR 检测方法。

    [关键词]血管内皮生长因子；瘢痕疙瘩；血管瘤；恶性黑色素瘤；SYBR green实时荧光定量PCR

    [中图分类号]R826.8[文献标识码]A[文章编号]1008-6455(2008)06-1025-03

    Establishment of VEGF mRNA detection by using SYBR green

    real-time fluorescent quantitative PCR

    LUAN Qi,SUN Jing,SUN Lin-chao,LI Chun-ying,GAO Tian-wen

    (Institute of Dermatology of Chinese PLA, Xijing Hospital, Fourth Military Medical University, Xi'an 710032, Shaanxi, China)

    Abstract:ObjectiveTo establish a method of SYBR green real-time quantitative PCR for detecting mRNA levels of VEGF, and apply the method to cosmetic diseases preliminarily ......

    http://www.100md.com/html/paper/1008-6455/2008/07/31.htm

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