逆转录为cDNA的总体积为20μl。取3μl的cDNA进行PCR，其总体积为25μl[2]。PCR产物经1.5%的琼脂糖凝胶电泳，紫外灯下观察结果。凝胶扫描分析目的基因灰度值，以β-actin为参照，计算相对OD值。相对OD值(%)=目的基因强度/β-actin 基因强度。

    1.2.5 统计学分析：所有结果均采用x±s表示，用 one-way Anova 分析比较组间差异，用统计软件包进行统计分析, 以P<0.05表示有统计学差异。

    2结果

    2.1形态学观察：倒置显微镜下观察，肋软骨原代细胞24h 贴壁，并有少量的细胞开始伸展，完全伸展的细胞呈现不规则的多角形，折光性强，约5～7天可铺满培养瓶进行传代。传代细胞约6h 就可贴壁且有细胞伸展的现象，约3～4天就可进行传代。

    2.2免疫组织化学染色观察：不同浓度IL-1β作用后的软骨细胞的蛋白多糖和胶原的表达量不同。随着IL-1β浓度的增高，aggrecan、collagen II的含量明显减少(图1、2)。低浓度的TGF-β1作用后的软骨细胞的蛋白多糖含量变化不大，高浓度的TGF-β1作用后的蛋白多糖含量高于对照组。TGF-β1作用后的细胞collagen Ⅱ的含量较对照组均有不同程度的降低，10ng/mlTGF-β1组降低的最为明显(图3、4)。

    2.3 RT-PCR结果：随着IL-1β浓度的增加 ......