胶原三肽对B16黑素瘤细胞黑素合成的影响
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1.3 统计学处理：实验数据采用SPSS11.0软件进行统计处理。
2结果与分析
2.1 细胞增殖活性测定：空白组，曲酸对照处理组及胶原三肽各处理组吸光度检测值经统计分析处理后无差异显著性(P>0.05)(如图1所示)，即空白组，曲酸对照组及胶原三肽各处理组细胞活性及细胞增殖程度无明显差异。表明胶原三肽浓度范围为50～400μg/ml时对B16黑素瘤细胞增殖无明显影响。
2.2 酪氨酸酶活性测定：胶原三肽浓度为400μg/ml时，其酪氨酸酶活性与空白组酪氨酸酶活性差异具有极显著性(P<0.01)(如图2所示)。曲酸对照处理组的酪氨酸酶活性与空白组酪氨酸酶活性差异具有极显著性(P<0.01)。但400μg/ml胶原三肽抑制酪氨酸酶活性与曲酸对照处理组抑制酪氨酸酶活性能力无显著性差异(P>0.05)。
2.3 黑色素含量测定：胶原三肽浓度为50～400μg/ml时均能显著降低B16黑素瘤细胞中黑色素的含量，且浓度为50μg/ml时其黑色素含量与空白组黑色素含量具有差异极显著性(P<0.01)(如图3所示)。曲酸对照处理组的黑色素含量与空白组黑色素含量亦呈现差异极显著性(P<0.01)。50μg/ml胶原三肽组黑色素含量低于曲酸对照组黑色素含量且差异具有显著性(P<0.05)，即50μg/ml胶原三肽抑制黑色素合成的能力强于曲酸对照处理组。
3讨论
正常情况下，决定皮肤颜色的主要原因有皮肤内各种色素的含量和皮肤的厚度及光线在皮肤表面的散射现象，其中黑色素起主要作用[8]。而酪氨酸酶是黑素生成途径中的主要限速酶。本研究结果表明400μg/ml胶原三肽处理组的酪氨酸酶活性与空白组相比具有差异极显著性，其与曲酸对照处理组抑制酪氨酸酶活性能力相当。且抑制能力与胶原三肽浓度呈正比，这与陈龙等[2]的研究结果相似。浓度范围为50～400μg/ml时胶原三肽均能显著抑制B16黑素瘤细胞内黑色素合成，且浓度为50μg/ml时其抑制能力最强，远高于曲酸对照处理组。但浓度为50μg/ml的胶原三肽抑制酪氨酸酶活性的能力并不显著，提示胶原三肽抑制黑色素合成可能与合成途径中的多个酶有关，也可能通过其他途径干预黑色素合成。浓度为50～400μg/ml胶原三肽其对B16黑素瘤细胞的增殖活性无明显影响。
本实验结果显示胶原三肽对B16黑素瘤细胞增殖活性无明显影响，但具有抑制B16黑素瘤细胞内酪氨酸酶活性功能及抑制细胞内黑色素合成的功能，表明胶原三肽具有一定的美白功能。其具体机制仍需进一步探索。
[参考文献]
[1]王白强,曾晓军.酪氨酸酶活性的抑制研究及皮肤美白化妆品的研制[J].福建轻纺,2002,7:1-6.
[2]丁卓平,刘振华,李仁冬,等.罗非鱼鱼皮胶原蛋白提取条件的研究[J].水产科技情报,2006,33(4)：190-192.
[3]陈龙,陈栋梁,杨国燕,等.鱼胶原肽抑制酪氨酸酶酶活性能力的比较研究[J].中国美容医学,2008,10：1512-1514.
[4]王静凤,王奕,崔凤霞,等.鱿鱼皮胶原蛋白多肽对B16黑素瘤细胞黑素合成的影响[J].营养学报,2007，23(9):1181-1184.
[5]王奕,王静凤,张瑾,等.日本刺参胶原肽对B16黑素瘤细胞黑素合成的影响[J].营养学报,2007,29(4)：401-404.
[6]摘译自：胶原水解物的皮肤渗透性及生物功能性[J].日本写真学会志.2004,67(4)：397-401；缪进康.译.明胶科学与技术,2006,26(1)：33-39 ......
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