UVB照射对PIG1细胞增殖活性的影响
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[摘要]目的：探讨UVB照射对正常人黑素细胞PIG1细胞形态及增殖活性的影响。方法：取对数生长期的PIG1细胞，分别以50、100、200、300、400、500、600和700mJ/cm2剂量的UVB照射后继续培养0h、24h和48h，在倒置显微镜下观察其形态学变化，用MTT法检测UVB照射对细胞增殖活性的影响。结果：在50～200 mJ/cm2的UVB辐射下，随辐射剂量的增大，PIG1细胞的增殖活性逐渐增加，倒置相差显微镜从形态学上证实了一定剂量的UVB照射可以促进细胞增殖。结论：一定剂量的UVB照射有刺激PIG1细胞增殖及树突生长的作用。
[关键词]PIG1细胞；UVB照射；增殖；树突
[中图分类号]Q813.1[文献标识码]A [文章编号]1008-6455(2011)06-0944-03
Effect of UVB irradiation on the proliferation of PIG1 cells
ZHU Dong-ning,JIAN Qiang,XUE Ke,LIU Bo-qiang,WANG Ling,LI Cheng-xin
(Department of Dermatology,Xijing Hospital,The Fourth Military Medical University,Xi'an710032, Shaanxi,China)
Abstract:ObjectiveTo investigate the effect of UVB irradiation on the proliferation of PIG1 cells.MethodsMorphology change of PIG1 cells was observed by light microscopy.MTT assay was used to record cellular activity.ResultsAfter UVB irradiation,the number of PIG1 cells was increased and the length of dendrites was extended. The proliferation activity of PIG1 cells was dependent on the irradiated dosages (50～200mJ/cm2).ConclusionsUVB irradiation can promote the proliferation activity of PIG1 cells and extend the dendrites of PIG1.
Key words:PIG1 cells; UVB irradiation; proliferation;dendrites
过量的紫外线照射可以导致皮肤灼伤、晒黑及免疫抑制，长期作用还可以引起皮肤光老化，并诱发皮肤癌[1-2]。紫外线辐射按波长不同分为UVA(315～400nm)、UVB(280～315nm)和UVC(100～280nm)。太阳辐射通过大气层时所有的UVC 和大约90%的UVB 能被臭氧、水汽、氧和二氧化碳吸收[3], 但是由于地球上方臭氧空洞的形成及增大, 大气层对UVB 的吸收减弱, 导致到达地球表面的UVB 的量迅速增加, 因此UVB对生物体损伤的机制及其防护的研究具有理论和实际意义[4-5]。目前，关于UVB照射对PIG1细胞增殖影响的研究多集中在采用单一或少数几组照射剂量，在照射后24h观察细胞增殖活性的变化[5-7]。本实验采用一组均匀递增的照射剂量，分别在照射后24h及48h时检测细胞的增殖活性，并在倒置显微镜下观察细胞形态的变化，以测定不同剂量UVB照射对PIG1细胞增殖活性的影响，以进一步探讨UVB照射与PIG1细胞增殖活性间时效与量效的关系。
1材料和方法
1.1主要试剂：254培养基购自Cascade Biologics公司，标准胎牛血清购自GibcoBRL公司，HMGS添加剂购自Cascade Biologics公司，胰蛋白酶、噻唑蓝(MTT)、二甲基亚砜(DMSO)均购自Sigma公司。
1.2 方法
1.2.1 细胞培养与接种：永生化的人表皮黑素细胞系PIG1来自美国艾利诺斯州Loyola医学中心。用含有5%胎牛血清的254培养基常规培养。取对数生长期的PIG1细胞消化后以2×104/ml的密度接种于96孔板，用于细胞活性检测。接种后的PIG1细胞培养至80%融合度时接受UVB照射。
1.2.2 UVB照射方法及能量密度的选择：实验使用上海希格玛公司生产的紫外线光疗仪，辐照度以UVB辐照度监示器标定,UVB剂量=UVB辐照度×时间(s)。由于254培养液可吸收一定的光量子而引起误差，因此每次照射前吸去培养液，用磷酸盐缓冲液(PBS)清洗1次后，96孔板每孔中加入100μl PBS。分别选用0、50、100、200、300、400、500、600和700mJ/cm2照射。照射后吸去PBS重新加入254培养基，培养至24h及48h检测细胞活性。
1.2.3 MTT法检测细胞活性：取接受不同能量照射后的PIG1细胞进行MTT比色试验 ......
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