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编号:12121154
低氧对人脐带间充质干细胞成脂肪分化的影响(2)
http://www.100md.com 2011年7月1日 唐军 徐斌 刘毅
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     2结果

    2.1hUCMSCs体外培养的形态学特点:在5~7天时,在倒置相差显微镜下可观察到成纤维状细胞从脐带组织块周围爬出,14~16天细胞可达80%以上融合,连续传至15代未见细胞形态有明显改变(见图1)。

    2.2hUCMSCs免疫表型分析:流式细胞仪检测结果显示(见图2),贴壁细胞均表达CD29、CD44、HLA-ABC,不表达造血细胞表型CD34、CD45,不表达免疫排斥相关表面标记HLA-DR,由此初步说明,从脐带分离出来的贴壁细胞为间充质干细胞。

    2.3 hUCMSCs的低氧处理后的观察(见图3):可见对照组(见图3A)、实验组1(见图3B)和实验组2(见图3C)分别给予常氧(20%O2)、低氧(2%O2)和低氧(2%O2)处理5天后,细胞形态无明显差异,但实验组细胞增殖数目明显多于对照组。

    2.4 低氧培养条件下hUCMSCs的成脂肪分化观察(见图4):各组加入成脂诱导培养基培养后,hUCMSCs形态由梭形逐渐变多角形、圆形,随培养时间的延长,部分细胞的细胞核周围出现一些折光性强的圆形脂肪小滴,脂肪滴逐渐增多,部分融合成大脂滴。油红0染色可见细胞内有橙红色的圆形脂肪滴,大小不等,有的融合成较大脂肪滴。与对照组(见图4A)比较,实验组1(见图4B)脂肪样细胞数量明显减少,约为对照组的(O.6±0.1)倍(P<0.01),有显著性差异;而实验组2(见图4C)脂肪样细胞数量显著增加,约为对照组的(1.6±0.2)倍(P

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