兔骨髓基质干细胞体外分离培养及生物学特性研究
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夏德林 刘道华 贾娟 付光新 陈俊良 周航宇 泸州医学院附属医院口腔颌面外科;
【摘要】目的:研究兔骨髓基质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BMSC)体外分离、诱导培养及增殖特点,探讨其生物学特性。方法:抽取兔骨髓,密度梯度离心结合贴壁培养法分离BMSC,诱导培养液定向诱导传代细胞向成骨细胞分化。倒置显微镜下观察细胞生长及增殖情况,流式细胞仪检测细胞表面标志物的表达,免疫组织化学观察Ⅰ型胶原表达,并检测碱性磷酸酶活性及细胞矿化作用。结果:体外培养的兔BMSC贴壁生长,10～14天后形成克隆。细胞形态为均一的长梭形并呈漩涡状排列,流式细胞仪检测CD34,CD45阴性,CD44阳性。免疫组化可检测到Ⅰ型胶原表达,碱性磷酸酶活性明显增高,并且出现矿化结节。结论:密度梯度离心结合贴壁培养BMSC,操作简单,细胞易于成活,诱导条件下成骨能力肯定,适合作为骨组织工程的种子细胞。
【关键词】 兔 骨髓基质干细胞 细胞培养 生物学特性
【基金】四川省科技厅应用基础研究项目(编号2008jy0014) 四川省卫生厅项目(编号070244) 泸州市科技局项目(编号10110)
【分类号】R329
基础研究骨髓基质干细胞是在骨髓中发现的一类具有自我更新能力和多向分化潜能的细胞,在特定条件下可以向成骨细胞、成软骨细胞、肌腱、脂肪细胞等分化。BMSC的成骨潜能已被实验所证实,目前已成为组织工程种子细胞研究的热点之一,分离、培养条件对获得高纯度的细胞至关重要。
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骨髓基质干细胞是在骨髓中发现的一类具有自我更新能力和多向分化潜能的细胞，在特定条件下可以向成骨细胞、成软骨细胞、肌腱、脂肪细胞等分化。BMsc的成骨潜能已被实验所证实，目前已成为组织工程种子细胞研究的热点之一，分离、培养条件对获得高纯度的细胞至关重要。本实验利用密度梯度离心结合贴壁法体外培养兔BMsc，观察生长、增殖特征，探讨其生物学特性，为后续实验奠定基础。
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