TDP对移植脂肪微血管形成的影响
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[摘要]目的：探讨TDP(特定电磁波谱辐射器)对移植脂肪块内微血管形成的作用。方法：利用雌性SD大鼠建立脂肪移植动物模型，随机分成TDP组和对照组，术后免疫组化血管染色定量测定移植脂肪块内微血管。结果：TDP组微血管定量测定高于对照组，两组比较P<0.05 结论：TDP照射能促进移植脂肪块内微血管形成，提高脂肪移植存活率。
[关键词]TDP；微血管；脂肪移植；存活率
[中图分类号]R622 R332 [文献标识码]A [文章编号]1008-6455(2012)02-0240-02
Effect of TDP on microvessel formation in autogenous fat transplantation
ZENG Ling-huan1,WU Yi2,LI Wei2,DENG Ying2,FAN Shi-mei2
(1.Department of Plastic Surgery,Sichuan Provincal Hospital of Integrated Traditional and Western Medicine,Chengdu 610041,Sichuan,China;2.Department of Plastic Surgery,Chongqing Emergency Medical Center,Chongqing 400014,China)
Abstract: Objective To investigate the effect of TDP on microvessel formation in autogenous fat graft. Methods Animal model of fat transplantation was created by using SD mices,then the mices were divided into TDP group and control group.The region of autogenous fat graft was treated with TDP for 30mins one time,3 times everyday in TDP group.The microvessel in fat graft was determined by immunohistochemical method. Results Microvessel index in TDP group was higher compare with control group(P<0.05). Conclusion It shows that TDP could improve survival rate of autogenous fat grafts by promotion vessel formation.
Key words:TDP;microvessel;fat transplantation;survival rate
自体脂肪移植在临床中的应用日益广泛，如何提高移植脂肪存活率是目前研究的热点，TDP(特定电磁波谱辐射器)具有改善辐照部位血循环，促进伤口愈合作用。本实验采用TDP照射移植脂肪区域，观察TDP对移植脂肪块内血管形成的影响。
1 资料和方法
1.1 动物模型制作：成年雌性SD大鼠96只，2%戊巴比妥钠(40mg/kg)腹腔内注射麻醉。消毒铺巾，剖开腹部，取输卵管旁脂肪组织，修剪所取脂肪团块，放入标记好液面的5ml量筒内，使液面刚好上升1ml，获取1ml体积的脂肪组织。在SD大鼠背部做0.5cm长切口，深至肉膜层，皮下分离适当大小腔隙，放入1ml体积的脂肪团块，缝合切口。随机将移植脂肪后的SD大鼠分为TDP组和对照组，每组48只。TDP组：术后每天用TDP照射术区三次，每次30min，TDP距照射区50cm高度；对照组：移植术后不做任何处理。分别于术后10、20、28天取出移植脂肪团块，10%中性甲醛固定，制作石蜡切片。
1.2 染色方法：采用美国Maxin公司鼠抗人CD34单克隆抗体，SP免疫组化试剂盒做血管染色，DAB显色，苏木素复染。
1.3 血管计数：每张切片分别在周边(上下左右)和中央各1个高倍视野，计算每高倍视野内微血管数目，取平均值。凡染成棕色单个内皮细胞簇均作为一个血管计数。管腔大于8个红细胞大小，带有较厚肌层的血管均不计数。
1.4统计方法：用SPSS19软件做统计学分析，t检验。
2结果
免疫组化染色血管显影呈棕色，微血管显影清晰，高倍(×400)视野计数显示移植术后10天、20天两组对比差异具有统计学意义，移植脂肪内血管密度随时间推移逐渐增加，血管生长20天达高峰。图1、2，表1。
3讨论
20世纪80年代随着脂肪抽吸术的广泛应用，Illouz[1]和Chajchir[2]等学者将通过脂肪抽吸获得的纯化脂肪颗粒用于注射填充软组织缺损。目前，自体脂肪颗粒移植主要用于以下方面：创伤及手术后的凹陷性瘢痕、面部凹陷、脂肪抽吸术后的凹凸不平、臀部的填充和成形、面部皱纹、半侧颜面萎缩、手指及手的皱纹、小乳畸形、乳头内陷畸形的矫正、上睑凹陷的矫正[3-5]等。但是，脂肪移植后有一定程度的吸收率，Chajchir[2]报道脂肪颗粒移植术后10-12个月吸收率为30%～60%，Dolsky[6]报道术后6～8个月吸收率在35%左右。
鉴于脂肪移植在临床应用非常广泛，如何提高脂肪移植存活率已成为整形外科研究的热点。近年来的研究表明：脂肪组织游离移植后，早期处于缺血状态，仅能通过组织液渗透获取营养。随后从受床向移植块内长入新生血管，并与原有血管吻合沟通，建立新血液循环。目前有向颗粒脂肪中加入辅助药以提高脂肪移植存活率的报道，主要辅助药有：碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)[7]、胰岛素、前列腺素、糖皮质激素等，但是辅助加药也受到一些限制。也有采取红外线照射提高移植脂肪存活率的报道[8]，利用物体吸收远红外线辐射后产生的继发效应，引起生物体内毛细血管扩张、组织血流量增加及代谢增强等变化，从而改善移植体血供。
本实验利用TDP照射移植脂肪区域，使用免疫组化法对脂肪移植块内微血管进行定量研究。杜学亮[9]认为免疫组化法在定量研究脂肪移植过程中的血管生成方面具有实际应用价值，能对脂肪移植存活效果的影响提供准确、有效的观察手段。因此，通过对微血管定量分析可以较好地判断移植脂肪的血液循环重建情况，并判断脂肪块的移植存活情况。
TDP辐射器其核心部件是一块能引起生物效应的辐射板，在特定的温度激发下，发射综合电磁波，通过激发第一信号系统和第二信号系统实现细胞信号转导，进而产生多种多样的细胞反应，促进机体康复。吴绍尧[10]的研究表明：特定电磁波谱(TDP)辐射器治疗软组织伤的病人具有止痛、消肿、活血化瘀等功能。姚玉周[11]报道TDP能增强骨折处血运循环，促进肿胀消退，加速骨折愈合 ......
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