杜仲提取物对小鼠皮肤光老化保护作用的实验研究(2)
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3.1.1皮肤一般形态：与空白组相比，蒸馏水灌胃组小鼠背侧表皮有早期轻度红斑形成，随着照射剂量的增加皮肤颜色加深、增厚、脱屑，严重者出现皱缩、粗糙变硬，失去弹性及光泽；与蒸馏水灌胃组相比，灌胃给药组小鼠无明显变化。
3.1.2皮肤组织形态学：见图1。空白组小鼠皮肤表皮层结构完整，细胞分层清晰，厚度正常，细胞成分及数量适中，真皮层可见波浪状纤维组织，排列有序，分布均匀，疏密有致。而蒸馏水灌胃组小鼠表皮层增厚并伴有角质层变厚，细胞分层不清；真皮层因纤维组织发生变性或破坏，纤维排列紊乱，分布不均，并有较多的炎性细胞浸润。与蒸馏水灌胃相比，高、低剂量灌胃组小鼠皮肤组织有部分改善，但仍可见表皮角质层增厚，真皮层纤维组织断裂、破碎，卷曲扭结。说明灌胃给予杜仲提取物能够减轻小鼠皮肤光老化的程度。
3.1.3小鼠血浆中SOD活力、MDA含量：结果见表1。与空白组相比，蒸馏水灌胃组小鼠血浆中SOD活力明显降低(P<0.05)，MDA含量明显升高(P<0.05)。与蒸馏水灌胃组相比，高剂量灌胃组小鼠血浆中SOD活力无显著性差异、MDA含量明显降低(P<0.05)；低剂量灌胃组小鼠血浆中SOD活力明显升高(P<0.05)、MDA含量明显降低(P<0.05)。
3.2 外用杜仲提取物对光老化模型小鼠的影响
3.2.1皮肤一般形态：与空白组相比，外涂基质组小鼠背侧表皮颜色加深、增厚、脱屑，严重者出现皱缩、粗糙变硬；与外涂基质组相比，外涂药物组小鼠背侧表皮仅有稍许皮肤增厚，无脱屑、颜色加深。
3.2.2皮肤组织形态学：见图2。空白组小鼠皮肤表皮层结构完整，细胞分层清晰，厚度正常，细胞成分及数量适中，真皮层可见波浪状纤维组织，排列有序，分布均匀，疏密有致。而外涂基质组大部分小鼠表皮层增厚并伴有角质层变厚，细胞分层不清。纤维排列紊乱，分布不均。与外涂基质组相比，外涂给药组小鼠皮肤组织受损程度明显减轻，较接近正常组织，表皮稍有增厚，真皮层可见较完整的纤维组织，少见断裂、破碎，未出现卷曲扭结。说明EE外用能有效地改善小鼠皮肤纤维组织的病变，延缓皮肤的光老化。
3.2.3 小鼠血浆中SOD活力、MDA含量：结果见表2。与空白组相比，外涂基质组小鼠血浆中SOD活力明显降低(P<0.05)，MDA含量明显升高(P<0.05)；与外涂基质组相比，外涂药物组小鼠血浆中SOD活力明显升高(P<0.05)、MDA含量显著降低(P<0.01)。
4 讨论
4.1 本实验采用的是复合光源(UVA+UVB)模拟日光，采用小剂量紫外线长时间照射小鼠皮肤的方法，最大程度地模拟皮肤自然光老化的病理过程。实验过程中，选择远距离照射，避免动物皮肤在短时间内被灼伤[3]，经摸索发现40cm为照射最佳距离。实验结果表明，低剂量灌胃组小鼠血浆中SOD活力明显升高(P<0.05)、MDA含量明显降低(P<0.05)，疗效优于高剂量组，说明高浓度的杜仲提取物可能会有毒性作用，而低浓度的杜仲提取物药效较好。
4.2 本实验对照组与空白组的结果比较显示，灌胃或外涂蒸馏水组小鼠皮肤组织的SOD降低，MDA升高，SOD减少使组织抗氧化防御体系作用减弱，过量的MDA进一步与磷酸酰乙醇胺和蛋白质交联，生成无活性的大分子复合物即脂褐素[4]，加重机体皮肤光老化。灌胃或外用给予杜仲提取物后，HE切片结果显示，杜仲提取物减轻了皮肤松弛、红斑、多皱纹等皮肤光老化现象，改善皮肤外观状态；小鼠血浆中SOD活力明显升高、MDA含量明显降低，说明杜仲提取物起到了外源性的抗氧化剂作用并使机体内氧化还原体系重新恢复平衡。从灌胃组和外用组的结果看，外用杜仲提取物对小鼠血浆中SOD尤其是MDA含量的影响比灌胃效果好，且中药外用具有低免疫原性、低毒副作用和皮肤耐受的优点，故采用外用杜仲提取物比灌胃更简洁、方便、低毒、高效。
4.3 本实验结果显示，杜仲提取物对皮肤光老化有一定改善作用，其机制与杜仲提取物能清除自由基和活性氧，防止其造成组织过氧化损伤有关。通过此实验研究不仅为杜仲抗衰防皱功效型产品的研制提供理论依据。
[参考文献]
[1]李建民,徐艳明,陈巧,等.杜仲对UVA致HaCaT细胞光老化保护作用的实验研究[J].中国美容医学,2010,19(009):1316-1318.
[2]张宁,陈巧云,徐艳明,等 ......
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