透明质酸对大鼠颗粒脂肪移植物存活影响的初步研究(2)
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参见附件。
1 材料和方法
1.1 主要材料与试剂
1.1.1实验动物：健康Wistar大鼠(由扬州大学医学院动物试验比较中心提供)，雌雄不限，体重(220±5)g。
1.1.2主要试剂：透明质酸，商品名：施沛特；规格：2ml：20mg。
1.2 主要实验方法和步骤
1.2.1自体脂肪的切取：1%的戊巴比妥钠(0.4ml/ 100g)大鼠腹腔内注射麻醉后，常规电动脱毛器备皮，5%碘伏消毒皮肤，在Wistar大鼠腹股沟内侧设计皮肤切口长度2cm，皮下切取自体脂肪组织体积约2ml。
1.2.2自体颗粒脂肪的纯化：将获取的自体脂肪样本剪碎成1mm3的小组织块，生理盐水洗涤，去除血细胞、细胞碎片，将脂肪组织放置去针头后的5ml空注射器中，注入生理盐水后静置，见分层现象出现后，上层为油脂、中间层为颗粒脂肪、最下层为冲洗液，从注射器中排出下部液体，反复冲洗3～4次，最后纱布滤过油脂和冲洗液可获得纯化的脂肪颗粒。
1.2.3移植物在wistar大鼠背部皮下的注射：三种充填移植物为0.3ml自体颗粒脂肪(Fat)、0.3ml透明质酸(HA)、0.3ml混合移植物(Fat-HA)(0.15ml透明质酸+0.15自体颗粒脂肪)(见图1)，选择lml注射器和15G针头在大鼠背部皮下分别注射形成三个类长条形的隆起：大鼠头侧长条形为自体脂肪移植物、中间为透明质酸移植物、尾侧为混合移植物(如图2)，分别记为Fat组、HA组和Fat+HA组。
1.2.4 移植物的大体观察：移植物注射后第30天，第60天，第90天时分别随机选取6只大鼠，观察移植物局部皮肤的红斑反应(0为无红斑：1为轻度红斑：2为中度红斑：3为重度红斑) ......
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