丹参总酚酸抑制酪氨酸酶机理研究(2)
丹参加8倍量90%乙醇,80℃回流提取2次,每次1h。滤过,合并滤液,60℃减压回收乙醇并浓缩至相对密度1.30~1.35,用热水洗至洗液无色,干燥,即得总丹参酮提取物[1,7]。
2.2 供试液配制
2.2.1 PBS缓冲液配制:精密称取磷酸二氢钠7.80g,用超纯水定容至1L,为A液。精密称取磷酸氢二钠17.80g,用超纯水定容至1L,为B液。121℃热压灭菌30min,使用时取等体积的A,B液体混合均匀,即得ph=6.8的PBS缓冲液。
2.2.2 酶溶液配制:精密称取酪氨酸酶4.60mg,用PBS缓冲液定容至10ml,摇匀,精密移取400μl,用PBS定容至10ml,即得浓度为0.0184mg·ml-1的酶溶液。
2.2.3 左旋多巴溶液配制:精密称取左旋多巴70.3mg,用PBS缓冲液定容至100ml,摇匀,超声10min,滤过,即得浓度为0.703mg·ml-1的左旋多巴溶液。
2.2.4 丹参总酚酸溶液配制:取丹参总酚酸提取物约10g,精密称定 ......
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2.2 供试液配制
2.2.1 PBS缓冲液配制:精密称取磷酸二氢钠7.80g,用超纯水定容至1L,为A液。精密称取磷酸氢二钠17.80g,用超纯水定容至1L,为B液。121℃热压灭菌30min,使用时取等体积的A,B液体混合均匀,即得ph=6.8的PBS缓冲液。
2.2.2 酶溶液配制:精密称取酪氨酸酶4.60mg,用PBS缓冲液定容至10ml,摇匀,精密移取400μl,用PBS定容至10ml,即得浓度为0.0184mg·ml-1的酶溶液。
2.2.3 左旋多巴溶液配制:精密称取左旋多巴70.3mg,用PBS缓冲液定容至100ml,摇匀,超声10min,滤过,即得浓度为0.703mg·ml-1的左旋多巴溶液。
2.2.4 丹参总酚酸溶液配制:取丹参总酚酸提取物约10g,精密称定 ......
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