A型肉毒毒素对人瘢痕疙瘩成纤维细胞凋亡影响的实验研究(2)
2.3 观察肉毒毒素对瘢痕疙瘩成纤维细胞凋亡的影响：收集第4代成纤维细胞，分成6组，实验组和空白对照組各3组。实验组加入含A型肉毒毒素5U/0.1ml的1%胎牛血清DMEM，空白对照组培养液中不加A型肉毒毒素。72h后流式细胞仪检测，观察细胞凋亡情况：六孔板中的细胞用PBS洗涤一次，加入1ml 0.25%胰酶消化细胞，待细胞变圆且有部分细胞悬浮时加入PBS终止消化。用移液枪轻轻吹打细胞，使细胞悬浮。收集于流式管中，离心、弃上清。加入3ml 4℃预冷的PBS完全重悬细胞，1 500r/min离心5min，弃上清，沉淀用300μl的Binding Buffer重悬。加入5μl Annexin V-FITC混匀后，再加入5μl Propidium Iodide混匀。室温下避光反应5min。于1h内进行流式细胞仪检测。
2.4 统计学分析：采用SPSS13.0软件进行统计分析，两组间的细胞光密度值比较采用两样本t检验，两组间细胞凋亡率比较采用χ2检验 ......
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2.4 统计学分析：采用SPSS13.0软件进行统计分析，两组间的细胞光密度值比较采用两样本t检验，两组间细胞凋亡率比较采用χ2检验 ......
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