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编号:13225497
具有皮肤美容应用潜能的透皮型弹性蛋白样多肽的制备(3)
http://www.100md.com 2017年5月15日 中国美容医学2017年第10期
     2.3 PTD-96ELP在ER2566中的誘导表达检测结果:如图5所示,SDS-PAGE分析表明,携带pPTD-96ELP的ER2566工程菌经IPTG诱导后可表达分子量约为53kDa的新生蛋白,与预期相符;同时,目标蛋白的表达量在IPTG诱导5h时达到峰值,约占菌体总蛋白的23.6%,进一步延长诱导表达时间并不能提高蛋白表达量。

    2.4 PTD-96ELP表达产物可溶性分析结果:如图6所示,SDS-PAGE分析表明,携带pPTD-96ELP的ER2566工程菌经IPTG诱导表达5h后目标蛋白主要位于细胞内,而周质空间内几乎没有目标蛋白。同时,目标蛋白主要位于菌体超声裂解后的沉淀中,提示该蛋白主要以包涵体形式表达。

    3 讨论

    鉴于具有串联重复序列的蛋白常因特定tRNA丰度的限制而难于表达,本研究使用大肠杆菌偏爱密码子对VAPGVGVAPGVGVAPGVGS基本单元的编码序列进行了修饰 ......
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