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编号:613210
富血小板血浆凝胶促进大鼠深Ⅱ度烧伤创面愈合的机制研究
http://www.100md.com 2022年10月2日 中国美容医学 2022年第9期
抗炎,1材料和方法,2结果,3讨论
     皮肤作为人体最大的器官,具有分泌汗液、排泄废物、维持体温、防止病原体入侵等多种功能

    。皮肤的结构主要由表皮、真皮层和皮下组织组成。由火、热水或蒸汽引起的深部皮肤损伤在临床上常见。这些患者容易感染和代谢失衡,有时导致截肢甚至死亡

    。因此,找到一种有效的解决方法,尽快愈合此类创面,显得尤为重要。富血小板血浆(Platelet-rich plasma,PRP)是全血经过二次低速离心分离而得到的血小板和血浆浓缩物,包含红细胞、白细胞和生长因子等物质,并已在颌面外科、心脏外科、整形外科、运动医学等领域取得了良好的治疗疗效

    。大量临床数据表明,烧伤患者采用自体富血小板血浆凝胶治疗可以提高烧伤创面愈合率、减少创面愈合时间、减轻创面疼痛、改善愈合质量

    。目前关于富血小板血浆凝胶促进烧伤创面愈合的相关机制尚不明确。本实验旨在通过建立大鼠深Ⅱ度烧伤模型,采用富血小板血浆凝胶治疗,通过观察创面愈合情况,炎症细胞和炎症反应、巨噬细胞表型的变化,初步探究富血小板血浆凝胶促进烧伤创面愈合的作用和可能机制。为富血小板血浆在烧伤创面治疗方面提供实验理论数据。

    1 材料和方法

    1.1 实验试剂与仪器:凝血酶购自Sigma公司,PerfectStart Green qPCR SuperMix购自全式金公司、RNase inhibitor、dNTPs、RevertAid Reverse Transcriptase购自Thermo公司、TNF-α、IL-10、TGF-β

    、PCR引物购自上海生物工程公司、iNOS抗体及CD206抗体、羊抗兔IgG二抗购自Servicebio公司。实时荧光定量PCR仪(ABI Q1)、PCR仪(北京东林昌盛科技有限公司)、切片机(莱卡)、包埋机(莱卡)、显微镜(尼康)、低温高速离心机(德国Thermo公司)。

    1.2 实验动物:6~8周龄雄性SD大鼠,平均体重180~220 g,购自济南彭悦实验动物繁育有限公司[动物合格证:SCXK(鲁)20190003],饲养在青岛大学附属医院SPF实验室[SYXK(鲁)20150003],并在安静,通风、恒温的环境下饲养,相对湿度50%,12 h光暗交替。独笼饲养,自由进水,喂食大鼠原用饲料,定时更换垫料。本实验经青岛大学附属医院实验动物伦理委员会审核、批准。

    1.3 烫伤模型的建立:大鼠适应性饲养1周后,将大鼠背部皮肤剪毛,用苯巴比妥(3.5 ml/kg)腹腔麻醉后,将小鼠置于俯卧位,将四肢固定在大鼠固定板上,使背部皮肤较平坦 ......

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