血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)和S-100B蛋白在急性脑梗死患者预测和预后评估中的临床意义(1)
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【摘要】目的:分析急性脑梗死患者血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)和S-100B蛋白浓度变化探讨其在脑梗死预测评估中的价值。方法:采用电化学发光免疫分析技术(ECLIA)和酶联免疫吸附法(ELISA)分别测定57例脑梗死患者和20例正常人血清NSE和S-100B蛋白浓度。应用SSPS11.5软件包进行统计学处理。结果:患者组NSE和S-100B蛋白浓度与对照组之间存在明显的统计学差异(P<0.01)，患者组之间也存在显著差异(P<0.01)，NSE和S-100B蛋白浓度与病情严重程度和预后之间存在相关性(P<0.01)。 结论:急性脑梗死患者血清NSE和S-100B蛋白浓度均明显增高。NSE和S-100B蛋白浓度高低不仅可以给神经元和神经胶质细胞的损伤程度提供定量信息，而且也是判断病情，评估预后的重要参数。
【关键词】脑梗死;神经元特异性烯醇化酶(NSE);S-100B蛋白
【中图分类号】R743.3 【文献标识码】A 【文章编号】1008-6455(2011)12-0071-02
1 材料与方法
1.1 研究对象
1.1.1 患者组：57例急性脑梗死病例是我院内科的住院患者，其中男34例，女23例，平均年龄(60.2±8.7)岁，诊断均符合第四届脑血管病会议修订脑梗死诊断标准〖2〗，所有患者入院72小时内行头颅CT或MRI，证实无肿瘤、无感染、无心、肝、肾疾病及其它免疫性疾病。并按PULLICINO公式计算梗死灶体积将其分为大、中、小型，其中小梗死灶23例(<5立方米)，中梗死灶20例(5-10立方米)，大梗死灶14例(>10立方米)。
1.1.2 对照组：对照组为20例同期体检健康者，男12例，女8例，平均年龄(48.4±12.3)岁。
1.2 标本的采集和处理: 所有患者均在入院48小时内抽取空腹静脉血3ml，于BD公司生产的促凝管中，3000r/min离心10min，分离血清后于-70℃低温冰箱冻存待测，对照组空腹采集静脉血3ml，按同样方法分离，冻存待测。
1.3 检测方法
1.3.1 试剂和仪器:仪器为雅培电化学发光分析仪，NSE试剂盒由雅培公司提供，S-100B蛋白试剂盒由第四军医大学生理教研室提供。瑞典SUNRISE酶标仪。
1.3.2 方法:NSE的检测采用电化学发光免疫法 ，S-100B蛋白的检测采用ELISA法，测定步骤均严格按试剂盒说明书进行。
1.3.3 统计学处理:应用SPSS11.5统计软件包进行统计分析，所有实验数据以(均数±标准差)的形式表示，组间比较采用T检验以及皮尔逊(Pearson)相关分析，P<0.01为有显著性差异。
2 结果
2.1 急性期和恢复期脑梗死患者NSE和S-100B与对照组比较:脑梗死患者血清NSE和S-100B蛋白浓度比较，急性期脑梗死患者血清NSE和S-100B蛋白浓度均较恢复期患者明显增高，恢复期患者又较健康对照组增高，直线相关分析显示，血清中NSE和S-100B蛋白呈正相关P<0.01，R0.758,见表1。
表1 急性期和恢复期脑梗死患者NSE和S-100B与对照组比较
注：与恢复期组比较，※P<0.01；与健康对照组比较▲P<0.01
2.2 脑梗死不同大小梗死灶血清NSE和S-100B浓度变化:脑梗死不同大小梗死灶血清NSE和S-100B蛋白浓度比较，中、小三组梗死灶患者血清NSE和S-100B蛋白浓度两两比较均有显著性差异。见表2
表2 脑梗死不同大小梗死灶血清NSE和S-100B浓度变化
注：与中梗死灶组比较※P<0.01，与小梗死灶组比较▲P<0.01
2.3 病情严重程度不同时血清NSE和S-100B蛋白的比较：不同病情严重程度脑梗死患者血清NSE和S-100B蛋白浓度比较，重度脑梗死患者NSE和S-100B蛋白浓度明显高于中度脑梗死患者。中度脑梗死患者明显高于轻度脑梗死患者，三者间均有显著性差异。与NSE、S-100B蛋白性质呈正相关(P<0.01)，见表3。
表3 病情严重程度不同时血清NSE和S-100B蛋白的比较
注：与中度患者组比较※P<0.01；与重度患者组比较▲P<0.01
3 讨论
烯醇化酶是生物体内参与糖酵解的 一种同工酶，由α、β、γ三种免疫性质不同的亚基组成αα、ββ、γγ、αβ、αγ五种二聚体同工酶,免疫组化研究表明γγ型特异的存在于神经内分泌细胞,故称之为神经元特异性烯醇化酶(NSE),NSE在糖酵解途径中催化α-磷酸甘油生成磷酸烯醇式丙酮酸,对维持神经系统生理功能极为重要.NSE被认为是神经元和神经内分泌细胞的标志物。
S-100蛋白是一种酸性钙结合蛋白,由免疫学性质不同的两种亚单位(即α-链和β-链)组成的二聚体。其中S-100B蛋白由两条β链构成，以高浓度存在于神经胶质细胞和中枢周围神经系统的Schwann细胞和Langerhans细胞以及垂体前叶细胞内，能够调节广泛的细胞内过程。而且在促进轴索生长和神经元分化以及钙自动调节平衡方面起重要作用。
脑梗死后脑损伤程度的预测定量评估及预后的早期评估一直受到科研及临床的广泛重视，其中一个重要方面即是神经生物化学的研究。
脑组织损伤后，大量可溶性物质释放入脑脊液。由于血脑屏障的破坏而进入血液循环，因此许多物质可能作为脑组织损害后的标志物。诸如腺苷酸激酶，天门冬氨酸转氨酶、乳酸脱氢酶、肌酸激酶等生物标志物均存在特异性低、临床实用性差的缺点，真正应用于临床的标志物应具有较高的敏感性和特异性。NSE和 S-100B蛋白被认为对中枢神经系统损害具有高度特异性，从而受到广泛关注。
当缺血缺氧中毒或损伤时，神经元坏死，细胞膜的完整性遭到破坏，NSE和S-100B蛋白不与细胞内机动蛋白结合，故较易从细胞浆内释放出来，迅速进入细胞间隙，进而通过血脑屏障释放入血。这为脑组织损伤后检测血清中NSE和S-100B蛋白提供了依据〖3〗。通过对57例急性脑梗死患者和20例正常人血清中NSE和S-100B蛋白浓度的测定发现急性脑梗死患者组血清与对照组之间存在着统计学差异(P<0.01)，S-100B蛋白均升高，可能因为大部分病变同时损坏了灰质和白质。与对照组之间存在着统计学差异P<0.01，恢复期两者浓度较对照组略高可能由于损伤时，细胞损伤时一个逐渐过程，神经细胞和神经胶质细胞可能持续一段时间急性期血清中NSE浓度升高程度较S-100B蛋白明显，即使在影像学上没有改变的短暂性脑缺血( TIA)患者NSE也会升高 ......
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