病毒性心肌炎慢性期Ｔｈ细胞凋亡蛋白的表达以及清心Ⅱ号的干预作用(2)
于底物蛋白，使蛋白分解引起凋亡。caspase-3是哺乳动物细胞凋亡中的关键酶，是细胞凋亡蛋白酶级联反应的必经之路，而caspase-9介导细胞毒性的死亡信号。NF-kB是调节基因转录的关键因子之一，参与许多基因特别是与机体防御功能和炎性反应有关的早期应答基因的调控。有研究表明NF-kB活化可能参与了心肌细胞凋亡相关的信号传导。因此，对NF-kB及其活化过程的研究，并通过对其基因表达水平的调控来影响各种免疫细胞的功能活性，而成为许多顽固性疾病的治疗手段，可见，caspase-3、caspase-9、NF-kB在免疫细胞的凋亡中具有重要意义。
本文研究结果表明，在小鼠VMC慢性期，透射电镜观察可见凋亡的T淋巴细胞，相对而言，模型组凋亡细胞数量较多。对照本课题前研究结果发现：在急性期、恢复期、慢性期模型相对于正常和治疗组都存在T细胞过度凋亡的现象，经过清心Ⅱ号干预后透射电镜观察T细胞凋亡数量以及细胞形态大致接近于正常组而且111细胞也存在凋亡过度的现象(P<0.01)，NF-Kb，caspase-3，caspase-9蛋白在Th细胞上的表达明显，这都一致表明在病毒性心肌炎的慢性期存在Th细胞的过度凋亡，并于T(h)细胞的过度凋亡中再现机体自身的免疫紊乱现象。经过清心Ⅱ号干预后，治疗组小鼠caspase-3和NF-kB蛋白在Th细胞上的表达受到抑制，和模型组比较有明显差异；而caspase-9的表达受抑制不明显，而且和模型组比较没有明显差别。因为caspase-3和caspase-9是影响细胞凋亡的两个不同的环节，两者的表达互相不受影响，因此可以认为清心Ⅱ号在病毒性心肌炎慢性期作用于细胞凋亡的执行酶caspase-3而使凋亡受到抑制，而对启动酶caspase-9的作用并不显著。对照同期急性期和恢复期研究：可以明显发现慢性期不同于前两期的作用环节。虽然NF-kb蛋白有抑制和促进细胞凋亡的双向作用，但在本实验中模型组小鼠NF-Kb蛋白明显表达时，并未显示出对Th细胞的过度凋亡(P<0.01)有明显的抑制作用。(或者抑制作用不明显)。因此，可以认为，在VMC慢性期，NF-kb主要是促进细胞的凋亡，而治疗组小鼠的NF-kb蛋白表达受到抑制，也说明抑制NF-kb蛋白的表达可能是清心Ⅱ号作用于VMC慢性期另一个环节。
, http://www.100md.com
清心Ⅱ号是本课题组在我国国家级名老中医陆芷青教授10年治疗VMC经验方清心饮的基础上，进行了拆方、药效、药理、制剂工艺、质控标准、急慢性毒理等较系统的研究而成的复方中药制剂。方中人参具有益气养阴之效，切中病机，为方中君药；苦参性味苦寒，归心经，故能泻心经火而解热毒，两药相配合，一清一补，祛邪而不伤正；丹参《神农本草经》将其列为上品，《日华子本草》称其功能为“养神定志、通利关脉……治血邪心烦”，既可清热凉血，又可养血活血散瘀，安神宁心，与苦参同为方中臣药。丹参人心经又可作为使药，引诸药直达病所，诸药合用，恰合病机，达到扶正祛邪、标本兼治的效果。
本文研究观察了清心Ⅱ号对VMC小鼠慢性期Th细胞凋亡的干预作用。结果发现：清心Ⅱ号能够抑制caspase-3和NF-kb蛋白在Th细胞上的表达，从而抑制了Th细胞凋亡，从而积极控制疾病发展，避免或减免VMC向扩张型心肌病演变。上述实验结果进一步阐明了复方中药制剂清心Ⅱ号治疗VMC的作用机制，并为清心Ⅱ号作为一种良好的免疫调节剂应用于临床提供了重要的实验依据。
[ 上 页 ], 百拇医药(程志清等)
本文研究结果表明，在小鼠VMC慢性期，透射电镜观察可见凋亡的T淋巴细胞，相对而言，模型组凋亡细胞数量较多。对照本课题前研究结果发现：在急性期、恢复期、慢性期模型相对于正常和治疗组都存在T细胞过度凋亡的现象，经过清心Ⅱ号干预后透射电镜观察T细胞凋亡数量以及细胞形态大致接近于正常组而且111细胞也存在凋亡过度的现象(P<0.01)，NF-Kb，caspase-3，caspase-9蛋白在Th细胞上的表达明显，这都一致表明在病毒性心肌炎的慢性期存在Th细胞的过度凋亡，并于T(h)细胞的过度凋亡中再现机体自身的免疫紊乱现象。经过清心Ⅱ号干预后，治疗组小鼠caspase-3和NF-kB蛋白在Th细胞上的表达受到抑制，和模型组比较有明显差异；而caspase-9的表达受抑制不明显，而且和模型组比较没有明显差别。因为caspase-3和caspase-9是影响细胞凋亡的两个不同的环节，两者的表达互相不受影响，因此可以认为清心Ⅱ号在病毒性心肌炎慢性期作用于细胞凋亡的执行酶caspase-3而使凋亡受到抑制，而对启动酶caspase-9的作用并不显著。对照同期急性期和恢复期研究：可以明显发现慢性期不同于前两期的作用环节。虽然NF-kb蛋白有抑制和促进细胞凋亡的双向作用，但在本实验中模型组小鼠NF-Kb蛋白明显表达时，并未显示出对Th细胞的过度凋亡(P<0.01)有明显的抑制作用。(或者抑制作用不明显)。因此，可以认为，在VMC慢性期，NF-kb主要是促进细胞的凋亡，而治疗组小鼠的NF-kb蛋白表达受到抑制，也说明抑制NF-kb蛋白的表达可能是清心Ⅱ号作用于VMC慢性期另一个环节。
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清心Ⅱ号是本课题组在我国国家级名老中医陆芷青教授10年治疗VMC经验方清心饮的基础上，进行了拆方、药效、药理、制剂工艺、质控标准、急慢性毒理等较系统的研究而成的复方中药制剂。方中人参具有益气养阴之效，切中病机，为方中君药；苦参性味苦寒，归心经，故能泻心经火而解热毒，两药相配合，一清一补，祛邪而不伤正；丹参《神农本草经》将其列为上品，《日华子本草》称其功能为“养神定志、通利关脉……治血邪心烦”，既可清热凉血，又可养血活血散瘀，安神宁心，与苦参同为方中臣药。丹参人心经又可作为使药，引诸药直达病所，诸药合用，恰合病机，达到扶正祛邪、标本兼治的效果。
本文研究观察了清心Ⅱ号对VMC小鼠慢性期Th细胞凋亡的干预作用。结果发现：清心Ⅱ号能够抑制caspase-3和NF-kb蛋白在Th细胞上的表达，从而抑制了Th细胞凋亡，从而积极控制疾病发展，避免或减免VMC向扩张型心肌病演变。上述实验结果进一步阐明了复方中药制剂清心Ⅱ号治疗VMC的作用机制，并为清心Ⅱ号作为一种良好的免疫调节剂应用于临床提供了重要的实验依据。
[ 上 页 ], 百拇医药(程志清等)