薯蓣皂苷元提取方法改良实验研究
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摘要：目的：建立快速精确的皂素提取方法。方法：运用超声提取方法。结果：超声频率300kHz、提取时间30min为最适宜。结论：该提取方法达到了省时、高效的目的。 关键词：超声提取；皂素 中图分类号：R284.2
文献标识码：A 文章编号：1673-7717(2007)12-2533-02
湖南省于1988年完成的距今最近的一次中药资源调查中，发现本省薯蓣属药用植物资源较丰富，有一定的蕴藏量，大都含有皂素类成分。湖南省薯蓣属植物分布在衡阳、怀化、长沙、郴州、岳阳等地，有盾叶薯蓣(Dioscorea zingibe-rensis C.H.Wright)、黄独(D.bulbifera L.OUr.)、薯蓣(D.opposita Thunb.)、细柄薯蓣(D.tenuipes Franch.et Say.)、福州薯蓣(D.futschauensis Uline exR.Knuth in Engl.Pflangenr.)、柴黄姜(D.nlpponlca Makino vRr rosthomii Prainet Burk.)、日本薯蓣(D.iaponicaThunb.)、薯莨(D.cirrfiosaLour.)9种；在民间分别用于补脾胃，平喘止咳，跌打损伤，止血活血，祛风利湿，解毒消肿。除盾叶薯蓣外，其他几种均未用于皂素原料的提取，仅限于民间治疗用药。
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为了更好地开发利用薯蓣属药用资源，笔者根据超声波的热效应、机械粉碎和空化作用，对以湖南省药用薯蓣为原料提取薯蓣皂苷元的提取工艺进行了多因素的研究，证明超声提取方法具有省时、节能、提取率高等优点，可以作为实验室和大生产的模拟工艺。
1.材料与方法
1.1材料的采集与处理 分析材料取自于湖南中医学院药用植物园趋同栽培1年后的以上9个品种，2003年11月中旬取材，均为2年生根茎段，每品种取10个单株。60℃干燥至恒重，粉碎，过60目筛。
1.2仪器与试剂 所用化学试剂均为国产分析纯。CSF-1A超声波发生器(上海超声波仪器厂)。薯蓣皂苷元对照品由湖南正清制药集团正驰公司提供，纯度为99.2%。
1.3皂素提取方法改良 杨文远等经多种条件实验筛选和优化，认为在索氏提取器中用95%乙醇提取粉末至无色、2.0mol/L HCI回流2.5h水解后直接用氯仿回流萃取的方法，皂苷元产量高，精密度理想。但此法耗时较长，笔者根据超声波的热效应、机械粉碎和空化作用，从超声提取时间、超声频率选择、超声与回流提取对比3个方面，对提取皂素的工艺进行了改良研究。结果见表1～3。
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①超声提取时间的确定：称取栽培1年的盾叶薯蓣粗粉(60目)，每份1g，分别加入95%乙醇60mL，以频率为20kHz的超声波分别处理10、20、30,40、60min。 ②超声频率选择：称取栽培1年的盾叶薯蓣粗粉(60目)，每份1g，分别加入95%乙醇60mL，用不同频率的超声波处理相同的时间。
③超声提取与回流提取比较：称取栽培1年的盾叶薯蓣粗粉(60目)，每份1g，分别加入95%乙醇60mL；A份用超声波提取，B份用回流提取，提取时间相同。按照肖冰梅的反相HPLC测定方法，测出薯蓣皂苷元含量。
2.结果与分析
2.1皂素提取方法的筛选和改良 实验证明超声提取方法具有省时、节能等优点，可以作为实验室和大生产的模拟工艺。在杨文远等的基础上，改用95%乙醇、300kHz超声提取30min，再经2mol/L HCl水解2.5h、氯仿直接萃取能够达到省时的目的。
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2.2超声提取时间的确定 见表1。从表1可见，提取时间超过30min后，薯蓣皂苷元含量增加甚微；可能是时间过长会导致乙醇溶液挥发过多，不能达到增效的目的。因此，超声提取时间以30min为最好。
2.3超声频率的选择依据2.1.1的结果，以不同频率处理30min，测定薯蓣皂苷元含量。结果见表2。 从上表可知，超声频率在300kHz处时皂苷元含量明显增高，频率继续提高反而呈现出不再增加的趋势。因此，结果以选择300kHz超声处理为最好。
2.4超声提取与回流提取比较 根据2.1.1及2.1.2的实验结果，A份样品以300kHz的超声波处理30min，B份样品于水浴锅上回流提取30min，按照肖冰梅等的反相HPLC测定方法，测出薯蓣皂苷元含量。
由表3可知，同样的提取时间下，超声提取与回流提取有显著性差异(P<0.05)。因此，本研究采用了超声300KHz、30min的提取方法达到了省时、高效的目的。
3.讨论
本研究采用的超声提取薯蓣皂苷元方法快速准确，分离效果好，样品溶液能长时间保持稳定，重复性好。, 百拇医药(郭锦明 肖冰梅 王朝晖 刘塔斯)