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编号:11646745
健肌宁对实验性重症肌无力大鼠胸腺差异表达蛋白谱的影响(2)
http://www.100md.com 2008年1月1日 《中华中医药学刊》 2008年第1期
健肌宁对实验性重症肌无力大鼠胸腺差异表达蛋白谱的影响

     2.4 图像分析每个样品常规进行3次二维电泳,通过光密度扫描仪对二维电泳凝胶扫描,Imagemaster软件对凝胶进行强度校正、点检测、背景消减、均一化、匹配、建立平均凝胶分析等。蛋白质点的相对强度百分比用来进行组间比较,以Ratio值≥1.5为差异点。

    2.5 MALDI—TOF—TOF串联质谱分析用手术刀片切下胶上目标条带,进行切胶、胶上酶解(trypsin,20h),抽提酶解肽段,Zip Tip脱盐后点样,行MALDI—TOF—TOF/MS分析[飞行管长2.7m,加速电压20kV,反射电压23kV,基质:HCCA(5mg/mL)]。将第1级质谱得到的肽片段质量指纹图谱、肽质量指纹图谱与第2级质谱得到的肽序列信息一起用来检索蛋白质数据库,找出匹配的蛋白质。

    2.6 统计分析实验数据以x±s表示,采用软件SPSS12.0进行统计分析,组间差异性比较采用方差分析。

    3 结果

    3.1 蛋白浓度及2-DE结果Bradford法定量胸腺蛋白浓度:iE常组28.78ug/uL;模型组29.20ug/ul ......
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