大孔吸附树脂富集纯化大黄总蒽醌的工艺研究
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摘要：目的：筛选纯化大黄总蒽醌的最佳树脂，确定树脂纯化大黄总蒽醌的工艺参敬。方法：以大黄中总蒽醌含量为指标，研究大孔吸附树脂富集、纯化大黄总蒽醌的吸附性能和洗脱参数。结果：x-5型树脂对大黄总蒽醌有良好的吸附性能。洗脱剂为60%乙醇，用量为6倍量树脂柱体积，大黄总蒽醌富集于60%乙醇洗脱液部分，且除杂质效果好。结论：通过x 5型大孔吸附树脂富集、纯化后，大黄总蒽醌的洗脱率在90%以上，总蒽醌的含量提高到35.4%。说明采用本法富集、纯化大黄总蒽醌是可行的。
关键词：大孔吸附树脂；大黄总蒽醌；纯化工艺
中国分类号：R284.2
文献标识码：A 文章编号：1673-7717(2008)01-0115-02
大孔吸附树脂是一类新型非离子型高分子化合物，应用于抗生素的提取分离等领域已近20年。近年来广泛应用于中草药化学成分的富集与纯化。根据其孔径、表面积、树脂结构、极性差异等分为多种类型，根据分离要求加以选择。大黄Radix et Rhizoma Rhei来源于蓼科植物，性寒味苦，是临床上常用中药之一。大黄的化学成分较复杂。其主要成分为蒽醌类衍生物，在前期实验中采用正交实验法优选出大黄总蒽醌的最佳提取工艺。本实验通过对不同型号大孔吸附树脂吸附性能进行筛选，确定了大黄采用x-5树脂，工艺稳定，质量可控，为大黄中药复方制剂的工艺研究提供了依据。
1 材料
zF-l三用紫外分析仪(上海精科实业有限公司)；x-5，AB-8。NKA-9树脂(南开大学化工厂，医药级)；大黄素对照品(中国药品生物制品检定所，批号：0756—200110)；大黄提取液(自制)；所用试剂均为分析纯。
2 大孔吸附树脂型号的选择
2.1 静态吸附行为考察取处理后的x 5树脂20mL置250mL量瓶中，取大黄醇提液一定体积。测定大黄总蒽醌含量。水浴挥散至无醇味，加入量瓶中，加水定容，振摇，放置24h，测定上清液中总蒽醌量，二者之差即为树脂的吸附量。同法处理AB-8、NKA-9树脂，测定结果见表1。
由此可见，x-5树脂对大黄总蒽醌吸附较好。其静态吸附总蒽醌4.4mg/mL树脂。
2.2 动态吸附行为考察准确量取预处理好的大孔吸附树脂x 5、AB-8、NKA-9各20mL，装人树脂柱中，乙醇冲洗至加水无混浊现象。再用蒸馏水冲洗至无醇味。吸取已知大黄总蒽醌含量的溶液，水浴挥散至无醇味，加水适量，通过3种不同型号树脂柱，进行动态吸附。待吸附均匀一致时，停止上样，记录上样体积，计算总蒽醌上样量x。用蒸馏水冲洗树脂柱，收集所有冲洗液，定容，测定大黄总蒽醌冲洗量Y。计算大黄总蒽醌吸附量(即x—Y)。将吸附的成分用95%乙醇洗脱至洗脱液近无色，定容，测定大黄总蒽醌解吸量。计算解吸率。结果见表2。
结果表明：x-5树脂对大黄有较好的吸附及解吸附作用。其动态吸附大黄总蒽醌约为4.25mr/mL树脂，故选择该附树脂作为大黄的最佳吸附树脂。
3 工艺研究
3.1 pH=3酸性条件下树脂对大黄总蒽醌的吸附准确量取预处理好的x 5大孔吸附树脂20mL，装入树脂柱中，处理同前。定量吸取已知含量的大黄总蒽醌溶液水浴挥散至无醇味，加水适量，调节pH=3，于树脂柱中进行动态吸附。结果见表3。
结果表明：树脂在pH=3条件下对大黄总蒽醌的吸附-量没有明显增加，故选择x-5树脂对大黄中蒽醌类成分提取时不调pH值。
3.2 加入低浓度氯化钠条件下树脂对大黄总蒽醌的吸附行为 本实验考察加入不同浓度氯化钠对吸附作用的影响。结果表明溶液中加入3%氯化钠其吸附量比正常参比溶液的吸附量有所增加，且其值与调整pH时的吸附量相当，考虑到氯化钠价廉，对人体无害，又不被大孔吸附树脂吸附，故只采用3%氯化钠来增加吸附量。
3.3 上样浓度的确定将不同浓度的大黄药材溶液分别通过已处理过的x-5大孔吸附树脂，考察不同生药浓度下的吸附行为。结果表明：不同上样浓度对树脂吸附量的影响不大，故选择醇提取后挥散至无醇味，适量加水后直接上样。
3.4 泄漏曲线的考察按上述所确定的吸附条件，进行动态吸附，分段收集流出液。每份10mL，共收集20份。测定大黄总蒽醌含量，并以总蒽醌量为考察指标，绘制泄漏曲线。结果见图1。
由测定结果及泄漏曲线可知，从第7份大黄总蒽醌开始明显泄漏，故确定大黄样品液最大上柱体积为70mL(即相当于树脂的3.5倍体积)。
3.5 洗脱剂的确定按上述所确定的吸附条件，用4根x-5树脂柱吸附大黄总蒽醌。先用水洗脱至洗脱液近无色，再分别用20%、40%、60%、80%乙醇洗脱，洗脱液定容，测定大黄总蒽醌的含量。结果表明60%乙醇能够将蒽醌类成分充分解吸下来。分段收集洗脱液，每份10mL，共收集20份，测定大黄总蒽醌含量。以总蒽醌含量为考察指标，绘制洗脱曲线，结果见图2。
结果表明：60%乙醇120mL(约6倍量)可将树脂中吸附的90%以上总蒽醌类成分充分洗脱下来。
3.6 树脂重复使用次数的考察按上述所确定的大黄吸附和洗脱条件，取大黄提取液进行上柱、吸附和洗脱，在同一根树脂柱上重复操作数次，分别计算大黄总葸醌的吸附量，确定树脂的重复使用次数。结果表明用x-5树脂吸附可重复使用4次后需进行再生处理。
3.7 大黄提取物中总蒽醌的测定大黄经树脂吸附后测得出膏率为5.7%，大黄总葸醌含量为35.49%。表明大黄药材经树脂富集、纯化后，其出膏率明显降低，而总蒽醌的含量提高到35%以上。
4 讨论
综上所述，x-5树脂能选择性的大幅度富集、纯化大黄总蒽醌，这可能与x-5树脂的特性有关系，X-5为非极性树脂，适于吸附分离中药中弱酸性有效物质。, 百拇医药(徐 晶 陈再兴 袁昌鲁)