心可舒片对血管内皮细胞凋亡及凋亡调控基因的影响(2)
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1.3.2不同时间AngII对凋亡及凋亡基因表达的影响及药物的干预作用 (1)对照组(control)：不加特殊试剂；(2)A组(AngII)：培养液中加入终浓度为10-6mol/L的AngII，分别在加入药物后的0.5、2、6、18、24h终止反应，收集细胞，进行流式细胞仪检测；(3)B组(5%含药血清组)：培养板中加入含药血清，终浓度为5%。孵育30min后加入终浓度为10-6mol/L的AngII，分别在上述不同时间终止反应，同(2)组。(4)C组(10%含药血清组)：培养板中加入含药血清，终浓度为10%。孵育30min后加入终浓度为10-6mol/L的AngII，分别在上述不同时间终止反应，同(2)组。
1.4流式细胞仪检测
细胞消化收集后，将其吹打成单细胞悬液，1000r/min离心5min，弃上清，用PBS漂洗，再离心，再漂洗后以100目筛网过滤，然后再离心(1500r/min，5min)，加入碘化丙啶(promide iodine，PI)工作液0.5mL，终浓度为10mg/L，室温避光30min后上机进行流式细胞仪检测。
上机前以标准荧光微球调整仪器的变异系数并稳定在2%以内，上机后收集2万个细胞，荧光强度以对数放大，光散射数据存软盘，测试完后在Macintosh 650计算机上用CellQuest Plot软件(BD公司提供)分析数据 ......
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