祛异康对子宫内膜异位症模型大鼠血管内皮生长因子的影响(1)
摘 要：目的：观察中药祛异康对子宫内膜异位症大鼠在位、异位子宫内膜组织血管内皮因子(VEGF)的表达情况，探讨其治疗子宫内膜异位症的机理。方法：将40只健康雌性SD大鼠分为4组: A组只行开关腹,B、C、D组均行内膜移植，造模完成后,A、B组以生理盐水灌胃，C、D组分别给予西药丹那唑、中药祛异康灌胃， 4周后于动情期处死，用免疫组化方法检测在位、异位子宫内膜组织VEGF的表达情况。结果:在降低异位内膜组织VEGF的表达上丹那唑组、祛异康组与模型组比较均有显著性差异(P0.05)。结论:祛异康能明显抑制子宫内膜异位症模型大鼠异位内膜的生长,使异位内膜萎缩,并能明显抑制异位内膜周围血管的形成；其治疗机理可能是通过降低VEGF在异位内膜组织中的表达而实现的。
关键词：子宫内膜异位症；大鼠模型；血管内皮因子；中药祛异康；实验研究
中图分类号：R285.5文献标识码：A
文章编号：1673-7717(2008)05-0979-03
, http://www.100md.com
Effect of Quyikang on VEGF of Endometriosis in Rats
YANG Jianbing1，MENG Qiaorong2，CHEN Mei1，LIU Dongping1，ZHU Lihong1
(1.Shaanxi University of Chinese Medicine，Xianyang 712046，Shaanxi，China；2.Tibet National College，Xianyang 712000，Shaanxi，China)
Abstract:Objective:to observe effect of Quyikang on VEGF expression in Emdometrium and endometriotic tissue in rats and explore the probable mechanisms.Methods:40 female SD rats divided into four groups,A group is control group,B,C and D groups are established of endometriosis modle rat.A,B groups were fed with 0.9%Nacl,C group was fed with Danazol fliud,D group fed with Quyikang fliud,After four weeks,all rats were skilled at the metaestrs stages.VEGF expression in Emdometrium and endometriotic tissue of each group were analyzed by immunohistochemistry mdthod.Results:compared with modle groups,the endometriotic tissue's volume of Quyikang group and Danazol group were also obviously reduced(P0.05).Conclusion:Quyikang could inhibit the growth and proliferation of endometriotic tissue in rats modle,and eliminate the neovascular networks on the surface of transplants:VEGF expression in endometriotic tissue was obviously reduced by Quyikang treatment.
, 百拇医药
Keywords:endometrisis;rat modle;vscular endothelial growth factor(VEGF);Quyikang;experiment study
子宫内膜异位症(endometriosis EMS)是一种具有种植生长、侵袭、远处转移和易复发等类似恶性肿瘤特点的疾病，故临床常表现为盆腔和腹部疼痛、痛经、性交痛、月经失调、不孕等，是育龄女性的常见多发病，严重影响妇女健康和生活质量[1]。本研究通过动物实验，从异位症模型大鼠在位、异位子宫内膜组织血管内皮因子(Vascular endothelial growth factor，VEGF)的表达情况，客观评价中药祛异康对子宫内膜异位症的作用机理。
1材料与方法
1.1 实验动物
健康SD 雌性大鼠40只，体重150～180g，由西安交通大学医学院动物中心提供(动物合格证号：医动字第08-005号)。
, http://www.100md.com
1.2实验药物
祛异康主要由当归、赤芍、川芎、三棱、桂枝、丹参等13味中药组成,购于陕西中医学院门诊部，将上药煎煮浓缩成含生药2g/mL；丹那唑(上海华联制药有限公司生产，国药准字H31021681)，用1%的甲基纤维素纳溶解成20mg/mL的溶液。
1.3 主要试剂
鼠抗人VEGF单克隆抗体即用S-ABC免疫组化试剂盒，购自武汉博士德公司。
1.4实验方法
1.4.1动物模型制作与分组SD大鼠适应性喂养3天后随机分成4组，每组10只。空白对照组(A组)：只行开腹关腹术；模型组(B组)、丹那唑组(C组)、祛异康组(D组)均采用种植内膜方法建立子宫内膜异位症动物模型[2]。造模当天肌注青霉素20万U/次，2次/天，连续3天，造模后7天打开腹腔观察异位内膜生长情况，以异位病灶呈米粒大小之结节，切面可见一线形闭合水孔，异位内膜组织均形成囊状，囊内为无色透明液体，或囊内形成多个串珠状，周围可见丰富血管形成，表明造模成功。术后第8天 A组、B组用生理盐水2mL/100g灌胃，1次/天；C组用丹那唑混悬液，含生药0.016g/mL100g灌胃(相当于成人每天剂量的16倍)，1次/天；D组用祛异康煎剂，含生药2g/mL，2mL/次灌胃(相当于成人每天剂量的6.125倍)，1次/天，各组均连续灌胃28天，择动情期处死。
, 百拇医药
1.4.2取材 各组动物分别取在位、异位内膜组织，10%福尔马林液固定，24h内常规脱水、透明、浸蜡、包埋、切片，做免疫组织化学染色S-ABC法检测血管内皮因子在大鼠子宫内膜及异位内膜中的表达。
1.4.3判断方法 采用Fromowitz组织化学评分法(H-score)[3]，每张切片观察5个视野(10×40)，得出阳性细胞百分率及计分，无阳性细胞为0分，阳性细胞百分率1%～25%为1分，阳性细胞介于26%～49%之间者为2分 ，阳性细胞>50%为3分；根据多数细胞的着色强度计算强度得分，无着色为0分，浅棕褐色为1分，棕褐色为2分，深棕褐色为3分；阳性率和强度计分相加后的结果：0～1分为(-)，2分(+)，3～4分为(++)，5～6分(+++)。, http://www.100md.com(杨鉴冰 孟巧绒 陈 梅 刘东平 朱丽红)
关键词：子宫内膜异位症；大鼠模型；血管内皮因子；中药祛异康；实验研究
中图分类号：R285.5文献标识码：A
文章编号：1673-7717(2008)05-0979-03
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Effect of Quyikang on VEGF of Endometriosis in Rats
YANG Jianbing1，MENG Qiaorong2，CHEN Mei1，LIU Dongping1，ZHU Lihong1
(1.Shaanxi University of Chinese Medicine，Xianyang 712046，Shaanxi，China；2.Tibet National College，Xianyang 712000，Shaanxi，China)
Abstract:Objective:to observe effect of Quyikang on VEGF expression in Emdometrium and endometriotic tissue in rats and explore the probable mechanisms.Methods:40 female SD rats divided into four groups,A group is control group,B,C and D groups are established of endometriosis modle rat.A,B groups were fed with 0.9%Nacl,C group was fed with Danazol fliud,D group fed with Quyikang fliud,After four weeks,all rats were skilled at the metaestrs stages.VEGF expression in Emdometrium and endometriotic tissue of each group were analyzed by immunohistochemistry mdthod.Results:compared with modle groups,the endometriotic tissue's volume of Quyikang group and Danazol group were also obviously reduced(P0.05).Conclusion:Quyikang could inhibit the growth and proliferation of endometriotic tissue in rats modle,and eliminate the neovascular networks on the surface of transplants:VEGF expression in endometriotic tissue was obviously reduced by Quyikang treatment.
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Keywords:endometrisis;rat modle;vscular endothelial growth factor(VEGF);Quyikang;experiment study
子宫内膜异位症(endometriosis EMS)是一种具有种植生长、侵袭、远处转移和易复发等类似恶性肿瘤特点的疾病，故临床常表现为盆腔和腹部疼痛、痛经、性交痛、月经失调、不孕等，是育龄女性的常见多发病，严重影响妇女健康和生活质量[1]。本研究通过动物实验，从异位症模型大鼠在位、异位子宫内膜组织血管内皮因子(Vascular endothelial growth factor，VEGF)的表达情况，客观评价中药祛异康对子宫内膜异位症的作用机理。
1材料与方法
1.1 实验动物
健康SD 雌性大鼠40只，体重150～180g，由西安交通大学医学院动物中心提供(动物合格证号：医动字第08-005号)。
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1.2实验药物
祛异康主要由当归、赤芍、川芎、三棱、桂枝、丹参等13味中药组成,购于陕西中医学院门诊部，将上药煎煮浓缩成含生药2g/mL；丹那唑(上海华联制药有限公司生产，国药准字H31021681)，用1%的甲基纤维素纳溶解成20mg/mL的溶液。
1.3 主要试剂
鼠抗人VEGF单克隆抗体即用S-ABC免疫组化试剂盒，购自武汉博士德公司。
1.4实验方法
1.4.1动物模型制作与分组SD大鼠适应性喂养3天后随机分成4组，每组10只。空白对照组(A组)：只行开腹关腹术；模型组(B组)、丹那唑组(C组)、祛异康组(D组)均采用种植内膜方法建立子宫内膜异位症动物模型[2]。造模当天肌注青霉素20万U/次，2次/天，连续3天，造模后7天打开腹腔观察异位内膜生长情况，以异位病灶呈米粒大小之结节，切面可见一线形闭合水孔，异位内膜组织均形成囊状，囊内为无色透明液体，或囊内形成多个串珠状，周围可见丰富血管形成，表明造模成功。术后第8天 A组、B组用生理盐水2mL/100g灌胃，1次/天；C组用丹那唑混悬液，含生药0.016g/mL100g灌胃(相当于成人每天剂量的16倍)，1次/天；D组用祛异康煎剂，含生药2g/mL，2mL/次灌胃(相当于成人每天剂量的6.125倍)，1次/天，各组均连续灌胃28天，择动情期处死。
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1.4.2取材 各组动物分别取在位、异位内膜组织，10%福尔马林液固定，24h内常规脱水、透明、浸蜡、包埋、切片，做免疫组织化学染色S-ABC法检测血管内皮因子在大鼠子宫内膜及异位内膜中的表达。
1.4.3判断方法 采用Fromowitz组织化学评分法(H-score)[3]，每张切片观察5个视野(10×40)，得出阳性细胞百分率及计分，无阳性细胞为0分，阳性细胞百分率1%～25%为1分，阳性细胞介于26%～49%之间者为2分 ，阳性细胞>50%为3分；根据多数细胞的着色强度计算强度得分，无着色为0分，浅棕褐色为1分，棕褐色为2分，深棕褐色为3分；阳性率和强度计分相加后的结果：0～1分为(-)，2分(+)，3～4分为(++)，5～6分(+++)。, http://www.100md.com(杨鉴冰 孟巧绒 陈 梅 刘东平 朱丽红)