因此，Hpa基因有望成为胰腺癌生物治疗的新靶点。另外，一些研究发现\[7-12\]，亚砷酸对多种恶性肿瘤的侵袭和转移性尚具有明显抑制作用。因此我们观察Hpa-siRNA联合亚砷酸对胰腺癌侵袭联合抑制效果。从而为将来亚砷酸联合Hpa-siRNA治疗胰腺癌患者提供理论基础和实验依据。

    1 材料和方法

    1.1 材料

    pGenesil-1.1质粒和大肠杆菌DH5α菌株由武汉晶赛生物有限公司构建和制备。胰腺癌SW1990细胞株购自中国科学院上海细胞库。亚砷酸冻干粉(10mg/支)由北京双鹭药业股份有限公司馈赠。Hpa基因序列自行设计，序列为：Hpa-F 5'- GAAAGACGGCTAAGATGC -3' Hpa-R5'- AAATGGTAGTTTCCTGCTC -3' 扩增片段大小为361bp。GAPDH452内参引物为：序列为GAPDH452-F 5'- ACCACAGTCCATGCCATCAC-3' GAPDH452-R 5'- TCCACCACCCTGTTGCTGTA-3' 扩增片段大小为452bp。紫外分光光度计(SHIMADZU)，DNA Marker、Eco31I内切酶、SacI内切酶和T4DNA Ligase链接酶(TaKaRa)， 质粒小抽试剂盒(北京博大泰恒生物技术有限公司)，水平电泳仪 DYY-III(北京六一仪器厂) ......