肾穿刺标本制片的质量控制
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文章编号：1009-5519(2007)09-1355-02 中图分类号：R36 文献标识码：B
为提高制片质量，笔者对本科多年肾穿刺标本制片技术和方法进行对比总结，在制片过程中各步骤的质量控制方面采取了一些措施，现介绍如下。
1 标本的固定和保存
1.1 光镜及免疫组化检查标本的固定：选择合适的固定液，及时固定。组织固定是制片的关键，组织干涸及固定不良是染色质量欠佳、脱片的主要原因。首先，将切好的标本应尽快放进固定液里固定，以防止组织的自溶、结构破坏，切勿使其干涸。其次，不同的固定液固定使肾穿刺活检标本切片在不同的镜下观察。因光镜与免疫组化检查共用一份标本，所以在选择固定液时应选择对二者均有良好的染色效果的含有磷酸盐缓冲液的固定液固定。笔者多采用PB-FA固定液进行固定，固定效果好，值得推荐使用。配方：浓甲醛15%，无水乙醇65%，0.05 mol/L pH 7.2-7.4磷酸缓冲液20%。其特点是固定的组织收缩小，肾小管上皮固定良好，无干裂状；组织中的红细胞不被溶解，HE染色及特殊染色色泽鲜艳，对比鲜明；免疫组化染色阳性信号表达好。常温下固定时间以2小时为佳。
1.2 免疫荧光检查标本的处理及保存：正确的标本处理是荧光标记成功的前提。荧光标本不用任何固定液固定，用冷藏或冷冻法保存。分切后的标本应放置在浸有生理盐水的纱布内并装入小标本瓶，盖好瓶口及时冷藏，以防止组织干涸、溶解破坏，阳性表达减弱；纱布以湿润为佳，不要太湿，以免组织浸泡肿胀而影响观察。分好的标本应立即切片染色为最佳。保存的方法有：(1)不包埋保存：于1个小时内制片的可将标本置于4℃冰箱内冷藏保存；(2)包埋保存：如遇当天不能切片的情况，为避免组织的反复冻溶，组织形态改变，不利于观察，最好的保存方法是将标本包埋在金属支持器上，置于-18℃冷冻保存，保存不应超过2天；(3)切片保存：切好的冰冻切片如不立即染色可将切片放在-18℃保存冷冻2天左右 ......
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