62例无偿献血者初筛血型误判及原因分析
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文章编号：1009-5519(2007)19-2933-01 中图分类号：R446 文献标识码：B
血型鉴定是每例献血者献血前的必查项目，由于目前多数献血模式为街头流动献血形式，受室外工作环境等诸多因素的影响，初筛血型鉴定的误判时有发生，笔者从2006年1～12月共检测了54 138例献血者血型，统计发现有62例初筛血型误判，对其误判原因进行分析如下。
1 材料与方法
1.1 标本：2006年1～12月献血标本54 138例。
1.2 试剂：单克隆抗-A、抗-B血型定型试剂(长春博德生物技术有限责任公司)A型和B型2%～4%标准红细胞(每日不同人份A 、B新鲜血各3份用生理盐水洗涤配制)。
1.3 仪器：STAR(澳斯邦公司)，96孔进口U型板(澳斯邦公司)，Hedolph TITRAMAX1000,恒温震荡仪，平板离心机(上海离心机厂)，酶标仪(SUNRISE)。
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1.4 正定型方法：用自动加样器STAR扫描各样管条码，并将2%～4%标本血球100μl加入到U型孔板中，每例两孔各50μl，同一标本的两孔内分别加入5 0μl抗-A、50 μl抗-B标准血清，平板离心机1 000 r/min，离心1分钟，37℃温育，1 350 r/min震荡3分钟后，酶标仪读板。
1.5 反定型方法：用自动加样器STAR扫描各样管条码，并将样品血浆60 μl加入到U型微孔板中，每例两孔各30 μl，每孔分别加入配制的A型和B型2%～4%标准红细胞30 μl，振荡孵育温度37℃，900 r/min，再置平板离心机上2 000 r/min离心15秒；振荡悬浮温度37℃，1 350 r/min振荡20秒后，改为6 00 r/min振荡1分钟，酶标仪读板。
1.6 酶标仪判读软件编程：原酶标仪判读有基本的判读程序，在此基础上扫描波长为350 nm，以水平线为非凝集参考线，挑选19个典型凝集曲线为参考曲线。酶标仪判读时，在每一孔读取40个点的数据，由这40个点组成一条曲线。将此曲线与挑选的19个经典曲线和水平线进行拟合，并设定统计误差。在误差范围内读取的线与水平线相拟合的为非凝集(-)；与19条经典曲线之一相拟合则为凝集(+)。
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2 结果
54138例标本中，发现初筛血型误判62例，占0.114%，各血型比例见表1、献血人数与误判比例见表2。
3 讨论
2006年1～12月，我中心实验室共检测初筛血型54 138例，其中62例初筛血型误判，占0.114%。AB型误定为A型的共21例，占33.8%，与献血者B抗原较弱或ABx亚型有关；A型误定为O型占17.7%，B型误定为O型的占14.5%，共20例，可能是A抗原、B抗原与抗A、抗B亲和力下降，而出现假阴性有关；表2结果显示，误定比例以3月、5月、6月明显上升，可能与这几个月献血人数偏多，街头献血者较多、采血现场比较拥挤，工作量比较大试验反应时间不足，反应不完全有关。还有2例在复检时正反定型不符后送血型参比实验室鉴定为BX亚型，一些亚型往往在反定型时被发现，说明反定型对于正确判定血型结果非常重要。血型抗原，抗体的多样性，复杂性，抗原抗体减弱，亚型的存在，冷凝集给初筛血型鉴定造成一定的困难。
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无偿献血者血型初筛，受多种原因的影响，初筛血型鉴定时有发生，这就要求我们做初筛时采用符合国家标准的高效价的标准血清，初筛现场要做好献血人群的合理安排，保证血液初筛各项目的有序进行，血型鉴定要保证足够的反应时间，标准血清不用时立即冷藏保存。初筛工作人员要加强责任心，保证初筛血型的准确性。同时中心实验室工作人员要有很强的工作责任心，做好正反定型的确定汇总工作。正反定型最好由不同人操作，工作责任心强，经验丰富，适当长期固定人员，反定型最好用完全抗凝血,消除纤维蛋白的影响(不同血样)。当判定结果出来以后,打出原始记录与微板结果、血样一一核对。当发现问题时按常规的检测追查分析原因，正反不合时，首先肯定红细胞血型做红细胞吸收放散试验[1]，以排除抗-A、抗-B不凝集的Am、Ael及Bm等弱亚型，其次是血型物质的测定[2]，中心实验室应及时纠正初筛血型错误，以确保临床输血安全。
参考文献：
[1] 孟订宝，兰炯采.徐州汉族人ABO血型及HAB分泌型基因分型研究[J].中国输血杂志，2001，14(4)：216.
[2] 陈 忠，张莉尼，王雪明.国内ABO血型缺乏14例文献综合分析[J].中国输血杂志，2001，14(5)：364.
收稿日期：2007-05-28, 百拇医药(易志梅)