集中化检测模式下ALT测定的探讨
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文章编号：1009-5519(2008)03-0415-02 中图分类号：R446 文献标识码：B
采供血机构实行血液集中化检测，是优化血站资源配置、保证输血安全的必然措施[1，2]，随着全自动加样系统在血站的应用，以前ALT的测定多采用微板速率法，但它在试验温度、反映时间，读板条件等方面所规定的实验检测状态受到手工操作的限制，使实验结果的重复性、特异性差，影响了检测的准确性以及快速性。所以，笔者运用全自动生化分析仪(速率法)检测ALT，同时对以上2种方法以及快速全血干式生化法进行比较，介绍如下：
1材料与方法
1.1对象：本试验所有标本均来自本血站无偿献血者。
1.2试剂与仪器：AU400全自动生化分析仪(日本OLYMPUS公司)；TECANRSP 200 全自动加样仪；TECAN恒温酶标仪(authos-Zenyth 340rt)；ALT酶测定试剂盒(英国 RANDOX 公司,批号089611)；ALT定值质控血清( OLYMPUS 公司)；丙氨酸氨基转移酶干式生化试纸(批号23747533)及 Reflotron Plus 快速全血生化仪(德国罗氏公司)。
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1.3生化分析仪速率法：在生化分析仪上全封闭检测，过程严格按试剂说明书要求进行。在检测样本的同时，分别对定值质控品进行多孔平行对照测定。
1.4微板速率法：使用TECAN全自动加样器在微板上分别加入30 μl血清，质控品和300 μl试剂后放入TECAN 全自动酶标仪37 ℃连续4分钟，在340 nm波长比色，参数的设定按照试剂使用说明。
1.5快速全血干式生化法(干式法)：用仪器专用移液器吸取20 μl全血标本加于试纸加样处，30秒内检测，约2分钟出结果，结果选用IFCC推荐方法37 ℃的测定值。
2结果
2.13种方法的酶活性比较及变异系数的比较：随机抽取88份标本用以上3种方法连续检测7次，结果见表1。全自动生化仪检测结果的变异系数最小，微板速率法变异系数最大。
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2.2准确性比较：取3种定值质控血清用微板速率法以及生化分析仪法2种方法连续测定40次，比较两种方法的准确性以及重复性，结果见表2。
3讨论
干式生化法检测方便，条件要求比较低，但是由于检测速度比较慢，而且不能批量进行，具有一定的检出限制，对于部分高值标本可能会出现检测结果为“0”的现象，不适合检验科内的使用需求。因此，全国大部分血站仅采用此方法在流动采血点进行献血员的筛查，效果比较好，大大减少了血液的不合格率，节约了献血员资源。
目前，很多血站检验科使用微板速率法检测ALT，由于该方法简便快速，可以批量进行，而且直接运用检验科现有的自动加样仪以及恒温酶标仪，仪器设备相对价格比较低廉，但是由于它在试验温度、反映时间、读板条件等方面所规定的实验检测状态受到手工操作的限制，不能达到全自动生化仪所具备的良好反应环境，使实验结果的重复性、特异性差，影响了检测的准确性以及可追溯性。同时由于本实验室使用TECAN RSP全自动加样器进行血清和试剂的加液，由于是加入血清后再整板加入试剂，受机械因素制约前几排开始比色时间往往在反应1min之后，因此理论上该方法所检测的标本酶活性结果比实际偏低。同时试验证明，该方法对乳糜、溶血等标本检测存在一些困难，高值质控血清的检测结果也偏低。
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全自动生化分析仪就能够很好的解决以上方法的不足[3，4]。(1)全自动生化分析仪是采用程序控制的全封闭检测系统，排除了人为因素造成的偶然误差，每批标本均带有质控品，并且能够进行回顾性结果分析、统计，解决了ALT的质控图问题；(2)能够解决识别标本的条码信息，根据血站自身的特点，它要求标本的任何一个检测项目，检测结果都能有记录可查询，并与标本的惟一性的条码对应，生化分析仪就很好的解决了这个问题，即便有个别标本条码不清晰，机器识别不出，也可以通过配备手工条码识别器解决；(3)数据传输：现在的采供血系统管理都是数据库管理。一定要实施数据的有效传输，检测结果联网，才能达到数据管理的目的。本站的管理软件较为灵活的解决了这个问题，数据自动发送，自动读取；(4)原始报告打印及原始数据的保存对采供血机构尤其重要，使用全自动生化分析仪检测ALT结果的原始数据，按照采供血机构的要求打印，统计汇总，便于保存；(5)对于乳糜以及溶血标本，本仪器可以通过设置自动稀释或者浓缩程序进行标本的重新检测，检测结果可以自动覆盖初次检测结果，极大的提高了检测速率和准确率。同时，生化分析仪检测速率为600次/小时，极大的满足了本单位对于集中化检测所提出的“快速，准确”的要求。因此，国内目前已有较多血站采用全自动生化分析仪进行ALT的检测[3]。
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参考文献：
[1]张勇，姜标.血站集中化检测中几个关键点的控制[J].临床输血与检验，2005,7(3)：1209.
[2]沈武，王迅.血液安全与血液集中化检[J].中国输血杂志，2005，18(2)：184.
[3]徐长根，朱阳泉.采供血机构ALT的自动生化分析仪测定[J].中国输血杂志，2006，19(4)：300.
[4]惠永庆，李慧.两种方法检测ALT的比较[J].临床输血与检验，2004，6(2)：137.
收稿日期：2007-10-22, 百拇医药(郝秀芳 张奕琴)