甲基化特异性PCR过程中的影响因素分析
文章编号：1009-5519(2008)12-1843-02 中图分类号：R446 文献标识码：ADNA甲基化是表观遗传学的重要研究内容之一。它是指在DNA甲基转移酶的作用下，将甲基添加在DNA分子中的碱基上，常见的DNA甲基化发生在DNA链上的胞嘧啶第五位碳原子和甲基间的共价结合，即形成5甲基胞嘧啶(5mC)，哺乳动物基因组中约70%的5mC存在于CpG二联核苷。DNA甲基化影响着基因的转录表达，因此它在基因的表达调控、细胞增殖、分化发育等方面起着重要作用，并与肿瘤的发生密切相关。但DNA甲基化的检测比较困难，近年来随着技术的进步，检测甲基化的方法也逐渐多起来，甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR，MS-PCR)就是其中一种快速敏感的甲基化检测方法。其特异性高，操作相对简便，费用和耗时都较小，可以进行超微量分析和同源基因分析。但在实验过程中也有很多因素可影响甲基化特异性PCR的分析结果。
进行MS-PCR的第一步是提取目的DNA，这一步的关键是提取的基因组DNA应是完整的，纯度要尽量高，要求A260/A280在1.8~2.0之间 ......
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