潘亚萍，漆洪波，罗 欣，刘西茹(重庆医科大学附属第一医院产科，重庆400016)

    子痫前期是妊娠期高血压疾病的一种，指妊娠20周以后出现的以高血压和蛋白尿为特点的一种全身性疾病，迄今为止仍是我国孕产妇及围生儿死亡的重要原因。既往研究证实，子痫前期与成人代谢综合征有诸多共同的病理生理特征，包括脂肪代谢异常、胰岛素抵抗和血液高凝状态，而这些异常状态可能与脂肪细胞因子的异常分泌相关，包括瘦素、脂联素(ADPN)、补体因子D(CFD)等[1-2]。子痫前期患者血清中ADPN水平降低，而CFD水平及其与ADPN的关系如何尚不清楚。本研究通过检测子痫前期孕妇胎盘组织、血清及尿液中CFD以及ADPN的水平，探讨其与子痫前期发病的相关性。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料 选取 2014年3～9月在重庆医科大学附属第一医院产科住院行剖宫产术的子痫前期孕妇29例(子痫前期组)，诊断标准参照《妇产科学》第8版全国统编教材，以及正常足月妊娠行择期剖宫产术的孕妇30例(正常妊娠组)为研究对象。两组均为单胎妊娠；既往无高血压、心脏病、肾脏病、糖尿病及甲状腺功能亢进等病史；无复发性自然流产、畸胎、死胎等不良孕产史；无吸烟、长期服用药物史。孕期无急、慢性感染性疾病；胎儿无畸形。两组孕妇年龄、体质量指数、孕产次、孕周、新生儿性别比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。

    1.2 方法

    1.2.1 标本采集 入院后，于治疗及分娩前取孕妇的清洁中段尿4 mL，经4℃低温离心后将上清液移出。同时抽取孕妇空腹外周肘静脉血5 mL，离心分离收集血清。血清及尿液样品均转入-80℃冰箱保存待测。剖宫产术中胎盘娩出后5 min内，避开肉眼可见的钙化灶及坏死区，取胎盘母体面中央组织约1.0 cm3大小，PBS漂洗后立即置于液氮中保存，过夜后转入-80℃冰箱保存待测。

    1.2.2 Western blotting检测胎盘组织CFD、ADPN蛋白的表达 严格按照蛋白提取试剂盒(海门碧云天生物技术研究所)说明书提取胎盘组织总蛋白。BCA法检测蛋白浓度(南京凯基生物技术研究所)。行SDS-PAGE电泳，将蛋白转移至PVDF膜(美国Millipore公司)，置于含5%脱脂奶粉、0.1%吐温-20的枸橼酸盐缓冲液中，室温封闭1 h后，分别加入兔抗人CFD、ADPN单隆抗体(稀释浓度分别为 1∶500 和 1∶1 000，美国 Abacm 公司，美国Santa Cruz公司)、兔抗人β-actin单克隆抗体(稀释浓度为 1∶1000，美国 Santa Cruz公司) ......