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编号:359923
超声法提取武当丹参药材中蛋白质的正交试验研究*
http://www.100md.com 2018年5月15日 现代医药卫生 2018年第9期
光度,1材料与方法,2结果,3讨论
     王 芳,尚雪莉,崔英英,张婷婷,熊 琳,2△(.湖北医药学院药护学院,湖北 十堰442000;2.湖北医药学院附属东风医院药学部,湖北十堰442008)

    丹参为唇形科植物丹参(salvia miltiorrhiza Bge.)的根和根茎采摘后干燥而得。丹参在我国作为中药使用由来已久,为传统中药中的一种,在临床实践治疗中常用于治疗心脑血管疾病、慢性肝病、癌症和骨质疏松[1?4]。植物中的初生代谢产物之一——蛋白质,在植物的生长过程中起着重要作用,与糖类、脂质及核酸等共同维持着植物细胞生命活动。近年来,有研究表明,中药的寒热药性与该药材中蛋白含量的高低具有一定相关性[5?6]。因此,通过蛋白质表达差异可研究不同生长环境对中药品质的影响[7]。本实验采用正交试验法优选武当丹参蛋白质提取工艺,以蛋白质含量为检测指标,对提取液(自制纯化水)pH值、提取温度、提取料液比(武当丹参与自制纯化水的比例)、提取时间进行了考察,以期探寻武当丹参中蛋白质提取的最佳工艺,为武当丹参蛋白质含量和该药材的药性和药材品质提供相关的实验依据。

    1 材料与方法

    1.1 材料 FA1004B型电子分析天平(可精密称定至0.000 1 g,苏州江东精密仪器有限公司)、DBCS?2400 型超声波清洗器(济南德邦机电设备有限公司,2 400 W,28 kHz)、H?2400R型高速冷冻离心机(上海江东仪器有限公司)、UV754PC紫外?可见分光光度计(上海佑科仪器仪表有限公司)。实验中所用丹参来源于武当山地区种植丹参(批号:20170514、20170623、20160703),购于湖北武当生物医药有限公司,鉴定人为李鹏主任药师(国药东风总医院)。其他材料为牛血清蛋白(BSA,批号:F2016806,Ruibio公司),实验用水为实验室自制纯化水。

    1.2 方法

    1.2.1 蛋白质标准溶液的配制 准确称取BSA 10.0 mg,用纯化水溶解并定容至100 mL,即得质量浓度为0.1 mg/mL的BSA标准溶液。

    1.2.2 考马斯亮蓝染色溶液的配制 取考马斯亮蓝G?250 100 mg,加入95%乙醇50 mL搅拌溶解,加入85%磷酸100 mL,用自制纯化水定容至1 000 mL ......

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