曾方林，束玉凤，王金富(扬州市第三人民医院检验科，江苏225000)

    结核病为目前世界传染病中病死率最高的一种传染病。据WHO报告，全球1/3人群(约20亿)感染了结核分枝杆菌，每年新发结核病例约900万，且每年新增病例的5%为多重耐药性结核菌株感染[1]。这些耐药株比敏感株具有更高的病死率和发病率[2?3]。对全国范围而言，利福平(RFP)与异烟肼(INH)双重耐药导致的耐多药结核也成为难治性结核的主要因素。目前，绝对浓度法和比例法是检测结核药物敏感性的常规方法，但其具有耗时长(通常需要4～8周)、不易标准化等缺点，易延误患者的治疗，而基于罗氏固体培养法的结核耐药诊断是最常用的检测方法，但其周期长、操作烦琐，也易耽误患者的治疗。随着分子生物学技术的发展，基于聚合酶链反应(PCR)和分子探针杂交技术的药敏试验检测方法得到广泛应用，可用于快速筛查多重耐药结核病患者。如能广泛、快速地进行抗结核药物的耐药性检测，对临床早期合理用药具有重要价值[4]。因此，本研究采用DNA?微阵列芯片法调查了扬州地区结核分枝杆菌(MTB)对RFP与INH耐药基因突变位点的分布特征，现报道如下。

    1 资料与方法

    1.1 资料

    1.1.1 标本来源 选取2015年8月至2017年8月本院收治的结核患者痰涂片抗酸染色阳性且经PCR?荧光探针鉴定为MTB患者的标本、传统结核培养鉴定为MTB的分离株标本、PCR?荧光探针法检测鉴定为MTB且CT值小于30(Hu)的各类标本。

    1.1.2 试剂 分枝杆菌核酸检测试剂盒和MTB耐药基因检测试剂盒(博奥生物有限公司产品)。检测指标包括RFP及INH的3个耐药相关基因rpoB基因启动子的野生型及不同突变型，其中RFP耐药相关基因rpoB基因检测6个位点，共13种突变型，含531位TCG→TTG、531位 TCG→TGG、526位 CAC→GAC、526位 CAC→TAC、526位 CAC→CTC、526位 CAC→CGC、511位 CTG→CCG、513位 CAA→CCA、513位 CAA→AAA、516位 GAC→GTC、516位 GAC→TAC、516位GAC→GGC及533位CTG→CCG ......