正交设计优化消肿止痛液最佳提取工艺
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【摘要】目的：为消肿止痛液新剂型的研制寻找最佳提取工艺。方法：采用L9(34)正交设计优取条件，以分光光度法测定各样品中主药大黄的有效成分大黄素的含量，通过统计学分析确定消肿止痛液的最佳提取工艺条件。结果：消肿止痛液的最佳提取工艺条件为A3B2C1D1。即药材加入8倍量60%乙醇回流提取1次，每次0.5小时。结论：本实验消肿止痛液新剂型的研制提供了科学的依据。
【关键词】正交设计；优化；提取工艺
【中图分类号】R284.2 【文献标识码】B 【文章编号】1009-6019(2008)-03-0093-1
消肿止痛液是由名老朝医的经验方改制而成的，由大黄、栀子、黄柏、红花等7味朝药组成。外伤肿痛主要是瘀阻筋脉，火毒内结为致，方中人黄，清热泻火、活血祛瘀：黄柏，泻火解毒；栀子，消肿止痛；红花，活血通经，去瘀止痈。如此配伍共奏，清热泻火、活血祛瘀，使消肿止痛之功效[3、4、5]。过去流传的用法是取朝药饮片，制成细粉，酒调，敷于患处，非常不方便。如今，利用现代工艺提取制成液体制剂，使用起来，方便了很多。为了找出最佳的提取条件，提高疗效，同时也为新药的开发做一些基础工作，设计了本实验，它将为朝药-消肿止痛液新剂型的研制提供科学依据。
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1仪器及实验材料
Spectrumlab22PC分光光度计；大黄素标准品(中国药品生物制品检定所)、其他试剂均为分析纯；药材购于延边医药公司。
2实验方法与结果
2.1考察因素及水平
根据处方中药材所含有效成分的理化性质及文献资料的报道，确定考查因素为乙醇浓度、用量、提取时间和提取次数[6，7]，各因素确定三个水平，见表1。
2.2正交设计优化提取
精密称取样品9份，按表2安排的实验条件进行提取，将各实验号的提取液分别滤过、回流浓缩、定容于50ml容量瓶中备用。
2.3线性回归与大黄素的含量测定
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精密称取大黄素标准品4.7mg，加入70%甲醇定容至10ml，作为标准溶液。精密吸取标准品溶液0.5、1.0、1.5、2.0和2.5ml，置50ml容量瓶中，加入70%的甲醇定容至10ml[8，9]。于344nm波长测定吸收度。浓度分别为0.024mg/ml、0.047mg/ml、0.071ml、0.094mg/ml、O.118mg/ml。吸光度分别为0.509、0.85l、1.053、1.180、1.173。
经线性回归得回归方程A=0.4533+7.091C，r=0.9949。另取各实验号提取液5ml，蒸至近干，加20ml70%甲醇回流0.5h，加入70%甲醇定容于50ml容量瓶中。于344nm处测定各实验号样品的吸收值，代人回归方程中求得各实验号中大黄素的含量[10]，结果见表2。
3实验结果分析
由表4可知，B*C显著，由B和C的交互作用表(表3)，取B2C1；A中选A3、D中选D1，各因素对消肿止痛液中大黄素提取工艺的影响规律为B*C>D>A[11]。分析结果表明消肿止痛液的最佳提取工艺条件为A3B2C1D1，即每次加入8倍量60%乙醇回流提取0.5小时，提取1次。
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4讨论
消肿止痛液新剂型的研发关键是筛选科学合理的提取工艺条件，从而确保消肿止痛液中有效成分提取完全，达到去粗取精的目的。本实验通过正交设计优化出了消肿止痛液的最佳提取工艺条件，为消肿止痛液新剂型的研制提供了科学的依据。
参考文献:
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