食源性金黄色葡萄球菌肠毒素基因及其表达检测
1材料与方法,2试验方法,2结果与分析,1金黄色葡萄球菌肠毒素基因携带情况,2金黄色葡萄球菌肠毒素分泌情况,3讨论,4结论
张 婧 张 易 施春雷(上海交通大学农业与生物学院 中美食品安全联合研究中心 上海 200240)
金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)是一种具有较强攻击性的常见人类病原菌,隶属于葡萄球菌属,可引起多种医院感染和社区感染性疾病,轻者引起化脓性皮肤感染,严重时甚至导致各种危及生命的并发症,如菌血症和心内膜炎[1]。金黄色葡萄球菌在环境中分布广泛,对外界不利环境如干燥、低温等有较强的抵抗能力,极易通过各种途径污染食品,会引发金黄色葡萄球菌食物中毒(S.aureus food poisoning,SFP),对食品安全和人类健康造成重大威胁。当金黄色葡萄球菌污染食品后,会在适宜的环境条件下大量繁殖,与此同时分泌各种毒素或毒力因子,如金黄色葡萄球菌肠毒素(Staphylococcal enterotoxins,SE),大大增加了其侵袭性和致病力。消费者食用了被金黄色葡萄球菌污染的食品后便会引起SFP[2],主要的中毒症状为腹泻、恶心、呕吐等,中毒严重者还会出现胃肠痉挛,体内水平衡失调甚至虚脱,脱水等症状[3]。根据美国疾病预防控制中心的研究报道[4],每年在美国由金黄色葡萄球菌导致的食物中毒约有24万人次,其中1 000多人需要住院治疗并约10人因此死亡,由该菌引起的食物中毒占整个细菌性食物中毒的33%;在加拿大,这个比例高达45%[5]。我国每年也会发生多起该类食品安全事件,给医疗卫生造成巨大压力。
据报道,由5种传统肠毒素SEA~SEE引起的金黄色葡萄球菌食物中毒占比高达95%[6]。来自许多不同国家和地区的研究显示,SEA是引起金黄色葡萄球菌食物中毒事件的最主要的肠毒素[7]。不同的金黄色葡萄球菌菌株会分泌不同类型的肠毒素,即使分泌同一种肠毒素,其产生量往往也会因生长环境不同而有差异[8]。鉴于肠毒素的多样性和多变性,以及其产生的普遍性,由肠毒素导致的金黄色葡萄球菌食物中毒在治疗和防御上都有很大难度,因此一直以来都是食源性污染监测的重点对象。本研究对比不同菌株、不同肠毒素基因的携带及其表达情况,有助于进一步分析肠毒素表达的环境条件,加强产肠毒素金黄色葡萄球菌的防范和控制,同时可为食品安全监控和风险评估提供数据支持。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 试验菌株
1)金黄色葡萄球菌食源性分离株:33株金黄色葡萄球菌食源性分离株,分离自2014年9月至2015年5月采集的上海市市售食品样品。分离和鉴定方法按照 《金黄色葡萄球菌检验方法》(GB4789.10-2010)第一法对采集的样品中污染的金黄色葡萄球菌进行选择性分离 ......
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