邓婷婷 黄文胜 葛毅强 陈 颖*

    (1 中国检验检疫科学研究院 北京100176 2 中国农业大学食品科学与营养工程学院 北京100083 3 科技部中国农村技术开发中心 北京100045)

    目前世界各国出于经济、卫生、环保等各种目的，纷纷对转基因生物及其产品加强管理和检测。包括中国在内的50 多个国家和地区相继颁布并实行了“转基因标识制度”，对转基因生物及其加工产品进行标识和管理。近年来，随着各国有关转基因生物(Genetically Modified Organism，GMO)标签法的建立和不断完善，对食品中的GMO 含量下限有所规定。很多国家不但要求对转基因食品进行定性检测，还要对食品中的GMO 含量进行定量检测，以便标识，其标识的阈值一般在0.9%～5%之间[1-4]。而建立转基因产品的检测技术尤其是精准定量检测技术是实施转基因产品标识的技术前提。转基因成分的精准定量技术将随着全世界标识制度的完善和发展日趋重要。

    我国转基因水稻研究处于国际领先水平，由我国自主研发的转基因抗虫水稻Bt 汕优63 品系是采用基因枪法将人工合成的Bt 基因cry1Ac/cry1Ab 导入受体水稻明恢63 基因组中经多代选育出来的，经抗虫试验，其防虫效果在95%以上[5-6]。2009年，转基因抗虫水稻Bt 汕优63(TT51-1)虽获得农业部颁发的湖北省安全生产证书[7]，但尚未实现商业化种植，因此在大米及其制品的日常检测和出入境检测监管中，该品系是我国重点关注的对象之一，需要建立转基因大米及其制品的转基因成分精准检测方法。转基因大米种类及其遗传修饰的多样性使得其检测变得越来越困难，其定量检测的要求也越来越高。随着国内外检测分析水平的提高，转基因大米及其制品的检测方法也将从最初定性分析逐渐转为精准定量分析。作为具有商业化前景的转基因大米品系TT51-1，目前的定量分析仍采用实时荧光PCR法，该方法需要根据标准样品绘制的标准曲线来推测样品中的转基因含量，标准品、样品的核酸提取质量以及PCR 扩增效率等均会对定量结果产生影响，很难达到较高的精确度，尤其是转基因成分含量低于1%水平时[6，8-9]，难以满足国际最低标识阈值0.1%[1]的检测需求。

    数字PCR(digital polymerase chain reaction，dPCR)是在实时荧光PCR 基础上发展起来的微量DNA分子定量技术。1999年由Vogelstein 和Kinzler 首次提出数字PCR 的概念[10]。如今的数字PCR 技术借助微流体平台将样本分成大量(数百 ......