刘权伟 李婷婷 励建荣*

    (1 渤海大学食品科学与工程学院 生鲜农产品贮藏加工及安全控制技术国家地方联合工程研究中心辽宁省食品安全重点实验室 辽宁省高等学校生鲜食品产业技术研究院 辽宁锦州121013 2 大连民族大学生命科学学院 辽宁大连116600)

    抗菌肽(Antimicrobial peptides)是先天免疫系统中至关重要的一部分， 它是生物体为抵抗病原微生物入侵，从而形成具有抗菌作用的短肽[1-2]。瑞典科学家Steiner 等[3]早在1981年就从罗宾蛾(Hyalophoracecropia)中得到具有杀菌活性的短肽Cecropin。 之后，人们陆续从各种生物体中分离出具有抑菌效果的短肽[4]。由于抗菌肽引起细胞死亡的机制不是与细胞膜上的特定受体结合， 而是与膜磷脂的非特异性相互作用[5]，所以抗菌肽产生耐药性的几率较小[6-7]。 同时，抗菌肽还具有抗菌谱广，杀菌活力强等特点，被认为是能够替代抗生素的首选药物，具有良好的应用前景[8]。 人们通过对已有抗菌肽的探索， 发现大多数天然抗菌肽具有两个相同的特征，首先基本是阳离子类型，其次，它主要是一种对水和脂类都有亲和力的两亲结构[9]。 经过大量研究，虽然抗菌肽的杀菌机理尚未明确， 但大多数抗菌肽被认为作用于细菌细胞膜上，发挥抑菌作用[10]。 另外，抗菌性与抗菌肽肽链形成的二级结构以及抗菌肽的生物学特性等方面也有关系。 例如含α-螺旋的抗菌肽通常会穿透细菌细胞膜的磷脂双分子层，导致跨膜电位消散，最终杀死细菌[11]。

    鲶鱼(Clarias fuscus)属于鱼纲鲶形目鲶科，多数生活在海水的中、下部，适应生存环境能力较强。 与其它类型的鱼相比，当周围环境恶劣时，鲶鱼的体表黏液和内脏会应激形成一些抗菌活性物质， 尤其是在受伤之后这种活性物质的产量显著增多[12]。 表皮分泌的黏液是鱼类天然免疫的重要部分[13-14]，它主要通过表皮杯状或黏液细胞产生的大分子蛋白发挥作用[15-16]。 早在1988年，Austin 等[17]初次报道了虹鳟鱼表皮黏液对传染性病原体有显著的抑制作用， 激发了研究人员对鱼类表皮黏液的研究热情。 Park 等[18]发现鲶鱼受伤后能够分泌抗菌肽，Su 等[19]在黄鲶鱼体表黏液中也分离到抗菌肽。 本实验室研究人员前期[20]从鲶鱼体表黏液粗提物中共分离获得4 个抗菌肽氨基酸片段，即：片段1：RLKEKNKA；片段2：RIVELTLPRVSVRL；片段3：KQEIILKF；片段4：RQIKIXRR。 使用这4个氨基酸片段， 通过固相合成法合成相对应的抗菌肽冻干粉 ......