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编号:39703
不动杆菌来源酯键水解酶生物信息学分析及PAEs降解机理
http://www.100md.com 2021年4月22日 2021年第3期
酯酶,残基,1材料与方法,1材料与试剂,2培养基,3仪器与设备,4方法,2结果与分析,1Aci-17对DBP的生物降解,216SrDNA鉴定,3Est96克隆,重组载体构建及蛋白诱导表达,4酯酶Est96
     王文华,李秀婷,徐友强,李微微,孙宝国*

    (1 北京食品营养与人类健康高精尖创新中心 北京工商大学 北京100048 2 北京市食品添加剂工程技术研究中心 北京工商大学 北京100048)

    邻苯二甲酸酯类 (Phthalate Esters,PAEs)因在提高塑料制品稳定性、柔韧性、凝聚力和防水性能等方面具有优良特性,故自20 世纪50年代起被广泛添加到各种塑料制品中[1-2]。目前全球PAEs的年消耗量高达6 800 万t[3],主要用于建筑、汽车、医疗产品、电线和电缆行业;也用作油漆、黏合剂、化妆品和润滑剂的添加剂[2]。PAEs 与塑料非共价连接,很容易从塑料中浸出和迁移到周围环境基质中[4-7]。由于大量生产和广泛使用,因此PAEs在不同环境中被频繁检出[8-12]。环境中的PAEs 会通过食物链对水生生物和人类健康产生负面影响[13]。如PAEs 可与雌激素受体结合,引起激素紊乱[14];干扰内分泌系统[15];诱导生殖毒性[16-17],肝脏过氧化物酶体增殖[18],肝细胞肿瘤[19];诱发儿童肥胖[20],并可能危害胎儿健康[21]。

    随着对其危害的逐步认识,PAEs 引发的健康问题成为人们关注的焦点,美国环保局已将最常见的PAEs 列为优先控制环境污染物[22-23]。除了在水体、土壤检测到PAEs 外,水稻、小麦、高粱等农作物中也不同程度地被检出邻苯二甲酸二甲酯(Dimethyl phthalate,DMP)、邻苯二甲酸二乙酯(Diethyl phthalate,DEP)、邻苯二甲酸二丁酯(Dibutyl phthalate,DBP)、邻苯二甲酸二异丁酯(Diisobutyl phthalate,DiBP)、邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯〔Di(2-ethylhexyl)phthalate,DEHP〕[24],可能通过饮食摄入增加人体健康风险。高效降解邻苯二甲酸酯成为解决这一问题的关键。

    在自然条件下,PAEs 结构稳定,其水解、光解速度非常缓慢,属于难降解物质[25-26]。在去除邻苯二甲酸酯的研究中,细菌降解的主导作用被广泛报道,成为环境中去除PAEs 的主要微生物[1,27],且新的高效降解细菌不断被发现,如从白酒曲中筛选获得1 株康氏副球菌 (Paracoccus.kondratievae)BJQ0001,对PAEs 降解有重要作用[28]。

    本试验从酒醅中分离出1 株可有效降解DBP的不动杆菌属细菌,命名为Aci-17。利用GenBank上已知酯降解基因序列的高度同源区设计引物 ......

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