郝 敏，李殿龙，徐俊亭，蔺洁茹，王 旭，施治臣，郝利民，刘振兴*

    (1 天津科技大学生物工程学院 天津300457 2 军事科学院军需工程技术研究所 北京100010)

    黑木耳作为一种珍贵的传统食用真菌，不仅能为人体提供氨基酸、蛋白质、膳食纤维等营养物质，还具有抗氧化、抗肿瘤、降血糖和预防心血管疾病等多种活性功能[1]。黑木耳含有多种营养成分，其中所含多糖成分的作用研究较为广泛，尤其是在食品和保健品开发方面具有应用价值，如黑木耳饮料、黑木耳口服液等[2-4]。研究发现，黑木耳多糖能够显著提高机体免疫力，抑制小鼠脾淋巴细胞转化增殖能力，增强其巨噬细胞吞噬能力和自然杀伤细胞活性[5-7]。

    肠道微生物是人体的重要代谢“器官”，在消化吸收、新陈代谢和免疫反应等生命活动中发挥关键性作用。随着对肠道微生物与机体健康研究的深入，发现正常生理条件下人体肠道菌群处于动态平衡状态，当内环境变化或受到外界刺激时，会导致肠道内菌群紊乱，对机体健康产生影响。例如，抗生素滥用会破坏肠道微生物种群平衡，增加炎症性疾病风险。益生菌通过分泌一系列抗菌物质(有机酸、过氧化氢和细菌素等)降低肠内pH，增加短链脂肪酸(Short chain fatty acid，SCFA)含量来减少病原体活菌数[8-9]。研究发现，多糖可以促进肠道优势菌增殖和调节肠道内分泌物[10-11]，从而促进肠道内环境稳态和机体健康。

    尽管黑木耳具有较高的营养价值和广阔的应用前景，但是其多糖成分对肠道微生物的调控作用与机制仍不清楚。为了明晰黑木耳多糖对肠道菌群变化的调控效应及其生物功能，本研究利用小鼠模型，分析黑木耳胞外多糖对小鼠肠道菌群多样性、SCFA 含量变化及血清细胞因子的影响，为黑木耳多糖益生菌微生态制剂和新型健康食品的开发提供理论基础。

    1 材料与方法

    1.1 原料与试剂

    黑木耳菌株(GenBank：KF297975.1，天津科技大学生物医药与分子生物学实验室保存)。

    无水乙醇(分析级)、葡萄糖(分析级)、浓硫酸(分析级)、二甲苯(分析级)，天津北方天医化学试剂厂；三氯甲烷(分析级)、异戊醇(分析级)、二氯甲烷(色谱级)，上海生工生物工程有限公司；乙酸、丙酸、丁酸、异丁酸、戊酸、异戊酸，上海源叶生物科技有限公司；柠檬酸钠抗原修复液，上海碧云天生物技术有限公司；牛血清白蛋白，北京索莱宝科技有限公司；GPR43 抗体，圣克鲁斯生物技术(上海)有限公司；FITC 标记的荧光二抗，赛默飞世尔科技(中国)有限公司；酶联免疫吸附(ELISA)试剂盒 ......