桦褐孔菌多糖对糖尿病小鼠的干预作用及机制
提物,水提物,1材料与方法,1实验动物及材料,2仪器与设备,3方法,4数据处理,2结果与分析,12种组分中活性成分含量的比较,2桦褐孔菌提取物对糖尿病小鼠体重,脏器指数的影响,3桦褐孔菌提取物对糖尿病小鼠空腹血糖的影响
夏 晴,王箴言,王 玉,杨 扬,张久亮(华中农业大学食品科学与技术学院 武汉430070)
糖尿病是以高血糖为主要特征的代谢性疾病,由胰岛素绝对或相对分泌不足所引起。据国际糖尿病联盟(IDF)最新统计显示:2015年全球糖尿病患病人数约为4.15 亿,而我国糖尿病患病人数居世界首位,约有1.1 亿人[1]。α-葡萄糖苷酶抑制剂可有效降低餐后血糖水平,被认为是治疗Ⅱ型糖尿病的关键因素[2]。目前为止,生物活性多糖对α-葡萄糖苷酶的抑制被广泛用于评估其体外降血糖的效果[3]。
桦褐孔菌(Inonotus obliquus)是一种生长在寒带的木腐菌,属担子菌亚门、层菌纲、非褐菌目(无褐菌目)、多孔菌科、褐卧孔菌属,主要分布于北半球北纬45°~50°的地区。自16 世纪以来,桦褐孔菌作为一种民间药物用作治疗胃、肠癌、心血管疾病[4]。有研究表明,桦褐孔菌含有200 多种活性物质,主要是多糖、桦褐孔菌素、三萜类化合物等,具有抗肿瘤、增强免疫、抗氧化、降血糖等功效[5-6]。Liang 等[7]报道桦褐孔菌多糖在高脂血症大鼠中表现出很强的抗氧化和降血脂能力。吕金玲等[8]开展桦褐孔菌各极性部位对四氧嘧啶诱导的糖尿病小鼠的药效学试验,确定桦褐孔菌多糖具有降糖活性。梁丽雅等[9]发现桦褐孔菌60%醇提物具有较好的体内抗氧化和抑制脂质过氧化的活性,并可改善血清的血脂水平。Wang 等[10]研究桦褐孔菌多糖对链脲佐菌素诱导的Ⅱ型糖尿病小鼠抗糖尿病作用及PI3K-Akt 信号通路的可能机制。多糖类活性物质传统上采用水提醇沉,而三萜类化合物通常采用乙醇浸提,实验室前期研究发现桦褐孔菌80%醇提物中三萜得率最高。虽然动物和临床试验显示桦褐孔菌具有降血糖作用,但是未见对桦褐孔菌发挥降血糖作用物质基础的报道。
本试验中采用高脂饮食联合腹腔注射STZ 的方法建立Ⅱ型糖尿病小鼠模型,用不同溶剂提取桦褐孔菌活性物质,探究桦褐孔菌水提物和醇提物对糖尿病小鼠糖脂代谢与抗氧化的影响。通过体外研究水提物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用及抑制类型,为明确桦褐孔菌提取物降血糖的物质基础和相关机制提供理论参考。
1 材料与方法
1.1 实验动物及材料
SPF 级昆明雄性小鼠(20±2)g,购自华中农业大学实验动物中心,许可证号为SCXK (鄂)2015-0019。桦褐孔菌,由东莞市神龟生物科技有限公司提供;STZ,美国Sigma 公司;盐酸二甲双胍,中美上海施贵宝制药有限公司;甘油三酯(TG)试剂盒、总胆固醇(TC)试剂盒、高密度脂蛋白(HDL-C)试剂盒、低密度脂蛋白(LDL-C)试剂盒、糖化血清蛋白(GSP)试剂盒、BCA 蛋白浓度试剂盒、超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒、过氧化氢酶(CAT)以及肝丙二醛(MDA)试剂盒 ......
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