张路遥，陈瑞盈，张 萌，卢 新，彭 强

    (西北农林科技大学食品科学与工程学院 陕西杨凌712100)

    蜂蜜是由蜜蜂采集植物的花蜜、分泌物或蜜露，与自身分泌物混合后，经自身酿造而成的天然甜物质[1]。因蜂蜜营养丰富，具有美容养颜，帮助消化，促进伤口愈合等作用而深受消费者喜爱[2]。蜂蜜成分复杂，容易受到蜜源植物种类、蜜蜂种类、空气的温度和湿度以及蜂蜜酿造时间等多种因素的影响[3]。在利益的驱动下，有些商户及厂家向蜂蜜中掺入果葡糖浆、麦芽糖浆、玉米糖浆等廉价糖浆，以天然蜂蜜的形式投放市场，欺骗消费者以获取暴利[4]。蜂蜜掺假损害了消费者权益，严重影响了蜂蜜市场秩序。

    对掺假蜂蜜的鉴别研究，一直是科研人员关注的课题。国内外已建立多种检测分析方法，如高效液相色谱法、碳稳定同位素分析法、近红外光谱法、核磁共振法、气相色谱法和差热分析法等[5-10]，这些方法所需仪器昂贵，检测成本较高，不适用于地方检测机构[11]。薄层色谱法(thin layer chromatographic，TLC)常用于物质的定性鉴别和筛选，是一种低成本、快速的检测方法[12]。在糖浆生产过程中，某些抗性糊精不能被完全酶解，其成品不可避免地存在少量聚合度较高的寡糖，而这种物质在真蜂蜜中并不存在[13-14]。2015 版药典采用薄层色谱法检测蜂蜜中的寡糖[15]，然而该方法分离效果不理想，影响结果判断，且需要通过肉眼观察TLC 薄层板来判断是否掺假，易造成较大的主观偏差[16]。建立经济、简便、有效的蜂蜜掺假检测方法，对维护消费者利益，保护消费者健康，规范蜂蜜市场具有重要意义。

    近年来，图像分析法用于定量评价薄层色谱图，TLC 图像可由CCD 摄像机或平板扫描仪获得，再用图像分析软件进一步处理，应用较广泛的图像分析软件有Image J、Image-Pro Plus、Scion ColorDens、TLSee、JustTLC 等[17-19]。这些软件有以下功能：(1)TLC 薄层板在展开显色过程中可能会被污染，可通过去除背景噪音来校正图像；(2)通过计算TLC 薄层板上特征斑点的峰面积或灰度值来进行定量分析；(3)绘制TLC 色谱图，每个特征斑点对应一个色谱峰。研究发现TLC 扫描法与TLC图像分析法对物质的定量分析无显著差异，图像分析法具有简便、快捷等优点，能够同时分析多个样品[20-21]。陆光兴等[22]用Image J 软件定量热凝胶β-1，3-葡寡糖，该方法灵敏度高，实现了对热凝胶β-1，3-葡寡糖的定量分析，相对标准偏差仅为1%～5%，且具有较好的稳定性；Fazakas 等[23]利用图像分析软件对荧光化合物进行定量分析 ......