田巧基，夏 凯，刘义凤，潘 聪，李海枝，段盛林

    (中国食品发酵工业研究院有限公司 北京100015)

    人类对甜味的喜爱是由遗传基因决定的，然而甜味为人类带来愉悦感的同时也带来了诸多健康问题，例如：肥胖、龋齿、胰岛素抵抗(IR)，甚至Ⅱ型糖尿病等[1-2]。针对膳食结构中碳水化合物过量，尤其是单糖摄入超标的不良现状，设计开发功能糖，减少单糖的摄入显得尤为重要[3]。

    NCI-H716 是1 株人结直肠腺癌细胞，常作为研究GLP-1 分泌及其信号通路的人源肠内分泌L细胞模型，该细胞可表达G 蛋白偶联甜味受体、Gα-味蛋白(Gα-gustducin)和TRPM5 等味觉受体及其下游信号元件[4]。小肠内分泌L 细胞分泌的肠源性激素包括血糖素样肽-1(GLP-1)、血糖素样肽-2(GLP-2)和酪酪肽(PYY)。其中，GLP-1 的作用是刺激胰岛素分泌，抑制胰高血糖素分泌，延缓胃排空并充当肠胃道和回肠“制动机制”的一部分，被称为食欲和摄食的“生理调节器”[5]。GLP-2的作用是刺激肠黏膜生长，抑制肠隐窝细胞凋亡，抑制胃排空和胃酸分泌[6-7]。PYY 的作用是增强饱腹感，抑制食欲[8]。

    实验室前期试验表明，人源化酵母模型证明海藻糖、异麦芽酮糖醇、棉籽糖等功能糖通过去糖基化作用回补由糖基化损伤造成的酵母菌生长抑制的现象。人体血糖生成指数(GI)测试结果表明，富含多元功能糖的特膳米属于低GI 食品，适合作为糖尿病人的主食选择[9]。虽然功能糖的生理功能得到肯定，但是其作用机理还未被阐明。本研究以NCI-H716 细胞构建的肠内分泌细胞为模型，评价山梨糖醇、赤藓糖醇、海藻糖、异麦芽酮糖醇、木糖醇和L-阿拉伯糖等功能糖对肠源性激素的促分泌作用，初步阐明功能糖改善人体糖、脂代谢的机理，继续探究功能糖促GLP-1 分泌的机理。

    1 材料与方法

    1.1 材料与试剂

    人结直肠腺癌细胞NCI-H716，购自中国医学科学院基础医学研究所；RPMI1640 培养基、高糖DMEM 培养基、平衡盐缓冲液(Hank's balanced salt solution，HBSS)、KRB 缓冲溶液(含10 mmol/L 葡萄糖)，中科迈晨科技有限公司；胎牛牛血清(Fetal Bovine Serum，FBS)，美国Gibco 公司；山梨糖醇、赤藓糖醇、海藻糖、异麦芽酮糖醇、木糖醇、L-阿拉伯糖，上海士锋生物科技有限公司；牛血清白蛋白(Bovine serum albumin，BSA)，北京拜尔迪生物技术有限公司；DPP-Ⅳ抑制剂 ......