区楚君，尚岱麒，吴酉芝，2，施春雷*

    (1 上海交通大学农业与生物学院 上海200240 2 上海中侨职业技术大学 上海201319)

    金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus，以下简称为金葡菌)一直以来都是我国监测的主要食源性致病菌之一。金葡菌之所以受到广泛的关注，是由于越来越多的案例证实，其不仅在食品中引起人群食物中毒和乳制品污染，而且在医疗过程中频繁引起医院和社区获得性感染，导致许多疾病难以完全治愈。金葡菌一般均具有较强的菌膜形成能力，使其广泛地存在于自然界的各种环境中，甚至人畜共患[3-4]。同时，菌膜被认为是耐药性传播的一种潜在载体，近年来日益凸显的细菌耐药性问题使得越来越多研究者的目光投向具有强菌膜形成能力的金葡菌。多项研究发现金葡菌存在多重耐药现象[5]，可能成为细菌耐药性传播的载体[6]，导致更加严重的耐药性问题。由此，金葡菌被世界卫生组织列为“高危害”监控对象[7]，我国也逐步提高了对金葡菌的重视程度。

    监控金葡菌的前提是能够有效鉴别、分离食品中的金葡菌。试验中一般依据GB 4789.10-2016《食品安全国家标准 食品微生物学检验 金黄色葡萄球菌检验》分离、鉴定食品基质中的金葡菌。该方法的主要步骤为：将待检测的食品放入无菌袋中，加入7.5%氯化钠肉汤进行增菌培养，然后根据Baird-Parker 琼脂平板和血平板上划线培养后的特异性现象鉴别、分离金葡菌。然而，本实验室研究人员前期试验发现，当检测冷冻肉(尤其是鸡肉)及肉制品时，常会出现一层灰色物质覆盖在Baird-Parker 琼脂平板上，改变了培养平板上可疑菌落的表观形态(如图1c所示)，严重影响研究人员依据国标进行结果判定的准确性，由此引起误判而导致出现大量的假阴性结果。初步判断该物质为冷冻食品中污染的另一类背景杂菌，具有生长速度快(快于金葡菌)且扩散性强的特性，不仅影响人眼判定的结果，而且在后续试验中无法分离单菌落，难以获得较好的纯化结果。同时该杂菌也存在溶血现象，在血平板上的培养特征与金葡差异性不大，会产生大量的假阳性结果，因此本试验不采用血平板作为选择性平板。为了解决此类食品中存在杂菌污染无法分离金葡菌的问题，本研究根据金葡菌的生物学特性和其它文献研究，优化国家标准中的增菌方法，引入改良后的胰蛋白酶大豆琼脂(TSA)平板分离杂菌及纯化金葡菌单菌落，以降低假阴性结果的出现，避免多次纯化而造成试验资源的浪费。 ......